精选优质文档-倾情为你奉上实验七 考马斯亮蓝G250法测定的蛋白质含量一、试验目的1. 学习分光光度计的原理及操作2. 学习利用染色方法提高蛋白质消光系数，以提高分光光度法检测灵敏度 二、基本原理1. 根据物质的吸收光谱进行定性或定量分析的方法称为吸收光谱法或分光光度法 。该法所用的仪器称为分光光度计或吸收光谱仪。该法所使用的光谱范围包括可见光和紫外光，即包括波长在200 - 800 nm之间的光。2. 分光光度计灵敏度高，测定速度快，应用范围广，其中的紫外/可见分光光度技术更是生物化学研究工作中必不可少的基本手段之一。 3.紫外区可分为紫外（近紫外）和真空紫外（远紫外）。由于吸收池（又称样品池、比色杯等）和光学元件以及氧气能吸收小于190nm波长的光，因此常规紫外测定集中在近紫外区，即 200nm-400nm。可见光区为400nm -800nm。4.考马斯亮蓝G250法原理：考马斯亮蓝G250与蛋白质结合后，其最大吸收波长从465nm改变为595nm,该蛋白染料复合物吸光系数很高，所以检测灵敏度很高，可以测定1g /mL的蛋白质，
