DNA重组与细胞转化(共3页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上实验一 DNA重组与细胞转化实验时间:2015.09.10姓名:朱恂学号:专业:临床八年带教老师:实验目的:1. 用粘端连接法将原癌基因c-myc外源DNA片段连接到pSV2质体载体中重建组织质粒2. 用CaCl2法制备感受态细胞(E.coli HB101)3. 将含有目的基因的pSV2质粒转入感受态细胞4. 用含抗菌素的平板培养基筛选转化体实验原理:1. 质粒载体(pSV)的构建2. 目的基因(c-myc基因片段)的获取3. 载体与目的基因的连接(粘端连接)4. 重组体导入受体细胞(CaCl2法制备感受态细胞)5. 鉴定重组体6. 目的基因在细胞中的表达7. 表达产物的分离、鉴定实验器材与试剂:1. 器材恒温摇床、电热恒温培养箱、无菌操作超净台、电热恒温水浴、台式离心机、低温离心机、漩涡振荡器、移液器、1.5ml离心管、制冰机、接种环、三角推棒、滴管等2. 试剂1) 用BamH I和Xba I处理的线状pSV质粒DNA(20ng/L)2) 用BamH

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