CCK8测细胞存活率(共1页).docx

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精选优质文档-倾情为你奉上CCK-8法测细胞存活率1、在96孔板中配置100L 的5000 CelLmL细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24h(37,5% CO2)。2、向培养板加入10L不同浓度的多肽1uM、2 uM 、5uM、10uM。每种多肽浓度设3个复孔,并设不加细胞液的调零孔和只加细胞液、不加肽液的空白对照孔。3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间24h。4、向每孔加入10L CCK溶液(注意不要再孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。5、将培养板在培养箱内孵育1-4h。6、一般用酶标仪测定在450nm处的吸光度。7、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 L0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24h内测定,吸光度不会发生变化。注意:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。活力计算

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