MIC的测定(微量二倍稀释法)(共3页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上微量肉汤稀释法测MIC一、试验原理目的细菌在96孔板MH培养基中生长,过段时间由于量大会产生白色沉淀,很容易区别有无菌落生长,将抑菌剂依次对倍稀释,加入菌悬液培养一段时间后,无沉淀的最后一个空即为MIC浓度。本试验微量样品即可测出最小抑菌浓度,且96孔板占地少,一板可做96个试验梯度,适用于大批量的检测试验,节约时间。二、试验器材、化学试剂及菌种96孔板、试管、5uL-50uL 微量移液器、100uL-1000uL微量移液器、以及配套的枪头、10mL离心管、麦氏比浊管、超净工作台、高压灭菌锅、鼓风干燥箱、生化培养箱、MH肉汤培养基、PBS缓冲液、无菌水。菌种:溶血性链球菌、溶血性葡萄球菌、李斯特菌、结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌、吸附性绿脓杆菌、大肠杆菌三、试验准备1、培养基的配置MH培养基42g,蒸馏水1000ml。灭菌后待用,若一次用不完可放入4冰箱中放置。使用前拿出放置室温即可。2、 工器具的灭菌 将配置好的MH培养基、PBS缓冲液、无菌水、配套枪头、离心管放入高压灭菌锅中灭菌,121杀菌25mi

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