免疫组化操作步骤(自编)(共10页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上免疫组化操作步骤 一 免疫组化( LP 法)操作步骤 : 1 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行 2. 缓冲液洗 3min/2 次。 3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。 4. 缓冲液洗 5min/2 次。 5. 滴加 Ultra V Block , 在室温下孵育 5 分钟以封闭非特异性的背景染色。 (注:孵育不要超过 10 分钟,否则会导致特异性染色降低。如果一抗的稀释液中含有 5 10% 正常羊血清,这一步可以省略。) 6. 缓冲液洗 5min/2 次。 7. 滴加一抗工作液 37 孵育 1 2 小时。(具体孵育时间和温度由试验者最终决定)8. 缓冲液洗 5min/2 次。 9 滴加 Primary Antibody Enhancer( 增强子 ) , 在室温下孵育 20 分钟。 10 缓冲液洗 5min/2 次。 11 滴加 HRP Polymer( 酶标二抗 ) ,在室

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