实验35过氧化氢酶的活性测定(共4页).doc

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资源描述

精选优质文档-倾情为你奉上植物在逆境下或衰老时,由于体内活性氧代谢加强而使H2O2发生累积。H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体。过氧化氢酶可以清除H2O2,是植物体内重要的酶促防御系统之一。因此,植物组织中H2O2含量和过氧化氢酶活性与植物的抗逆性密切相关。本实验用分光光度法测定过氧化氢含量,利用高锰酸钾滴定法和紫外吸收法测定过氧化氢酶活性。一、过氧化氢含量的测定【原理】H2O2与硫酸钛(或氯化钛)生成过氧化物钛复合物黄色沉淀,可被HSO4溶解后,在415nm波长下比色测定。在一定范围内,其颜色深浅与H2O2浓度呈线性关系。【仪器和用具】研钵;移液管0.2ml2支,5ml1支;容量瓶10ml7个,离心管5ml8支;离心机;分光光度计。【试剂】100mol/L H2O2丙酮试剂:取30%分析纯H2O2 57l,溶于100ml,再稀释100倍;2mol/L硫酸;5%(W/V)硫酸钛;丙酮;浓氨水。 【方法】 1.制作标准曲线:取10ml离心管7支

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