精选优质文档-倾情为你奉上细菌样品前处理取液体或固体培养基中培养20h左右、旺盛生长的菌体。(1)收集菌体:液体培养基中的菌体,可取培养液8000rpm离心35min,弃上清,倒入2.5%戊二醛固定液;固体培养基上的菌体,可在菌落表面滴几滴戊二醛固定液,轻刮菌落(注意不要刮下培养基)。将菌液吸入小离心管,离心后换入新鲜戊二醛固定。(2)固定,脱水按常规方法。2.5%戊二醛,24h磷酸缓冲液清洗3次1%锇酸46h缓冲液清洗3次乙醇梯度脱水,30%,50%,70%,85%,95%各一次,100%乙醇2次,1520min/次乙酸异戊酯置换2次,20min/次(注意:每步均需离心,8000rpm,35min,弃上清,倒入下一种试剂,滴管来回吸几下,打散菌块)。(3)临界点干燥: 普通定性滤纸裁成35mm18mm的纸条,将长边35mm平均分成3份,对折成小纸包,用订书钉将一端订牢,成小口袋状。将离心浓缩后的菌液滴入小纸包,立即用钉书器将另一端钉牢。放入临界点干燥器样品室,进行CO2临界点干燥。一般每次可同时处理1020种不同菌样(注意,需用
