精选优质文档-倾情为你奉上液氮研磨组织提取RNA步骤一、试剂与耗材(RNA提取专用,无RNase)75%的酒精(用无酶水配制),RNase Zap, Trizol(Invitrogen),氯仿,异丙醇,无RNA酶水(Ambion);研钵,研杵,1.5ml EP管,2.0ml EP管,15ml 管,50ml 管,棉纱布。二、操作步骤1) 用75%酒精对实验操作台、移液枪、枪头盒、管架进行消毒,然后再用RNase Zap擦拭上述材料。2) 取出-80冰箱保存的组织块,放于用液氮预冷过的研钵中,敲碎一小块组织,其余放回冻存管。3) 加入液氮,先轻轻敲碎组织到最小块,再研磨成粉末,直到看不到组织块。4) 加入液氮使粉末凝聚成团,马上用药勺把粉末转移到2.0ml EP管中。5) 待液氮挥发干后,加入1ml Trizol裂解液,用1ml移液器将细胞吹散开,保证细胞裂解充分,必要时可借助水平振荡器混匀。6) 4离心机12000rpm离心5分钟,弃沉淀。注:此时可放入-80低温冰箱长期保存。7) 加入氯仿,比例200ul氯仿/ml Trizol