精选优质文档-倾情为你奉上植物组织中SOD活性的测定超氧物歧化酶(SOD)是需氧生物中普遍存在的一种含金属酶。它与过氧化物酶、过氧化 氢酶等酶协同作用防御活性氧或其他过氧化物自由基对细胞系统的伤害;SOD可以催化氧自由基的歧化反应,生成过氧化氢、过氧化氢又可以被过氧化氢酶转化成无害的分子氧和水。【原理】依据SOD抑制NBT在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧的条件下极易再氧化而产生02-,02- 可将NBT还原为蓝色的甲,后者在560 nm处有最大吸收。而SOD作为氧自由基的清除剂可抑制此反应。于是光还原反应后,反应液蓝色愈深,说明酶活性越低,反正酶活性越高。一个酶活单位定义为将NBT的还原抑制到对照一半(50%)时所需的酶量。【仪器与用具】离心机;分光光度计;进样器;紫光灯(4000 Lx);15 mm150 mm试管;黑色硬质套。【试剂】 0.05mol/L 磷酸缓冲液PBS(pH=7.8)提取介质50mmol/L PBS(pH=7.8)内含1% 聚乙烯吡咯烷酮 130mm