精选优质文档-倾情为你奉上一般普通质粒扩增：先将质粒转化到DH5等大肠杆菌中，通过扩大培养获取大量含有质粒的大肠杆菌。大肠杆菌的培养需要用到LB液体培养基，配方见下文。根据质粒带有的抗生素抗性基因，还需要在LB中加入适量相应抗生素，如氨苄青霉素、卡那霉素等。LB 液体培养基(Luria-Bertani) ：称取蛋白胨(Tryptone)10 g，酵母提取物(Yeast extract) 5 g，NaCl 10 g，溶于800ml 去离子水中，用NaOH 调 pH至7.5, 加去离子水至总体积 1 升,高压下蒸气灭菌 20 分钟。 质粒提取目前一般都有商业化生成的试剂盒销售，可按照相应试剂盒的说明书操作。转化： 取出感受态细胞（也有商品化感受态销售），冰浴10分钟。 取连接产物10l 放入感受态细胞中（100l/管） ，轻轻旋转以混匀内容物，冰浴 30分钟。 42热休克 120 秒（按照需要加长或减少时间），不能摇动Ep管。冰浴 5 分钟，然后转移到事先预热至 37的无抗生素的普通LB培养基800ul，50100rpm
