精选优质文档-倾情为你奉上实验三 双抗夹心ELISA法检测IL-1 白细胞介素-1(IL-1)是一种单核因子,主要由单核细胞-巨噬细胞、上皮细胞以及树突状细胞分泌。它可以促进多种细胞增殖和活化,对免疫应答有重要的调节作用,也被称为淋巴细胞激活因子或内源性热原质等。本实验采用双抗加薪ELISA法检测人血清中的IL-1浓度,将标准品、待测样本加入到预先包被人IL-1单克隆抗体的酶标板中,洗涤除去未结合的成分,再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗人IL-1抗体,它将与人IL-1结合而形成免疫复合物,最后加入底物(OPD)显色,其颜色深浅(450nm波长下测定OD值)与样品中人IL-1浓度呈正相关。【试剂与器材】预包被的酶标板,HRP标记的抗人IL-1抗体、重组IL-1标准品、待检样品、样品稀释液;洗涤液、显色液(含底物及酶反应体系)、终止液;37度恒温水浴锅、酶标仪、微量加样器、一次性吸头、吸水纸等。【方法】1、 吸取包被抗体加入凹孔板中,每孔200微升,将凹孔板置于湿盒中,与37度作用1-2个小时候,再置40度冰箱过夜,从冰箱取出凹孔板,帅弃孔中液体,注