精选优质文档-倾情为你奉上水杨酸法测定黄酮对羟自由基清除能力的实验一、实验原理 利用 Fenton 反应产生羟自由基:H2O2+Fe2+ =OH+H2O+Fe3+在反应体系中加入水杨酸,Fenton 反应生成的羟自由基与水杨酸反应,生成于 510 nm 处有特殊吸收的 2,3- 二羟基苯甲酸,反应式如下:如果向反应体系中加入具有清除羟自由基功能的被测物,就会减少生成的羟自由基,从而使有色化合物的生成量相应减少。采用固定反应时间法,在 510 nm 处测量含被测物反应液的吸光度,并与空白液比较,以测定被测物对羟自由基的清除作用。其清除率计算公式为:羟自由基清除率(%)=A0(AxAx0) /A0100其中 A0 为空白对照的吸光值, Ax 为加样品的吸光值, Ax0 为不加显色剂 H2O2二、实验步骤各溶液的加入量按照表 1 所示,在比色管中依次先加入 9 mmol / L FeSO4, 9 mmol / L 乙醇 - 水杨酸,接着加入适量去离子水,最后加入 8.8 mmol / LH2O2 后摇匀,37水浴加热 15 min