1、选修 3专题 1 基因工程一、基因工程的概念理解1.供体 :提供 _;2.操作 环 境 :_;3.操作水平 :_;4.原理 :_;5.受体 :表达目的基因 ;6.本 质 :性状在 _体内表达 ;7.优 点(1)与 杂 交育种相比 :克服了 _的障碍。(2)与 诱变 育种相比 :_改造生物 遗传 性状。目的基因 体外分子水平 基因重 组受体远缘杂 交不 亲 和定向二、 DNA重 组 技 术 的基本工具1.限制性核酸内切 酶 (简 称 :_)(1)来源 :主要是从 _生物中分离 纯 化出来的。(2)作用 :识别 特定的 _并切开相 应 两个核苷酸之 间的 _。(3)结 果 :产 生 _或平末端。2
2、.DNA连 接 酶(1)种 类 :按来源可分 为 E coliDNA连 接 酶 和 T4DNA连 接 酶 。(2)作用 :在两个核苷酸之 间 形成磷酸二 酯键 以 连 接 _。限制 酶原核核苷酸序列磷酸二 酯键黏性末端两段 DNA片段3.载 体(1)种 类 :_、 噬菌体的衍生物、 动 植物病毒等。能自我复制(2)质 粒特点 有一个至多个 _有特殊的 _质 粒限制 酶 切割位点标记 基因三、基因工程的基本操作程序1.目的基因的 获 取(1)目的基因 :主要是指 编码 蛋白 质 的 _。(2)获 取方法 :从 _中 获 取目的基因利用 _扩 增目的基因通 过 DNA合成 仪 用化学方法直接人工合
3、成基因基因文 库PCR技 术2.基因表达 载 体的构建 基因工程的核心(1)基因表达 载 体的 组 成 :_、启 动 子、 终 止子、 _。 启 动 子 :a.位置 :位于 _。b.作用 :是 RNA聚合 酶 识别 和 结 合的部位 ,驱动 基因 _,最 终获 得所需要的蛋白 质 。 终 止子 :a.位置 :位于基因的尾端。b.作用 :使 _在所需要的地方停止下来。目的基因 标记基因基因的首端转录 出 mRNA转录(2)构建目的 : 使目的基因在 _中 稳 定存在 ,并且可以 遗传给 下一代 ; 使 _能 够 表达和 发挥 作用。受体 细 胞目的基因3.将目的基因 导 入受体 细 胞(1)转 化 :目的基因 进 入受体 细 胞内 ,并且在受体 细 胞内 维 持 _的 过 程。(2)常用方法 (连线 ):稳定和表达4.目的基因的 检测 与 鉴 定方 法 检测 或 鉴 定目的 水平DNA分子 杂 交技 术 检测 目的基因的有无 _水平分子 杂 交技 术 _ 目的基因是否翻 译生物性状的表达与否 _ 个体水平目的基因是否 转录抗原 -抗体 杂 交技 术目的基因是否表达分子
