细胞实验的基本操作(共15页).docx

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精选优质文档-倾情为你奉上细胞实验的基本操作【细胞培养】 一、细胞的复苏:非原代培养的细胞一般冻存于液氮之中,需要培养时要先从液氮中取出使之复苏。细胞复苏的原则快速融化:必须将冻存在196液氮中的细胞快速融化至37,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。具体操作如下:1、实验前准备:1.1、将水浴锅预热至37,并将含10%FBS的培养液置于其中预热;。1.2、用75酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。1.3、在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。2、取出冻存管及迅速解冻:2.1、根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。2.2、从液氮罐中取出细胞盒,取出所需的细胞,同时核对管外的编号。2.3、迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使管中的液体迅速融化,约1-2min后冻存管内液体完全溶解,取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁,再拿入超净台内。3、平衡离心 将细胞悬液吸到离心管中,10001500rpm离心3分

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