1、本科毕业论文（20 届）复方山葛降脂胶囊的降脂作用研究所在学院 专业班级 中药学(中药分析与鉴定方向) 学生姓名 学号 指导教师 职称 完成日期 年 月 I诚 信 声 明我 声 明 ， 所 呈 交 的 毕 业 论 文 是 本 人 在 老 师 指 导 下 进 行 的 研 究 工 作 及 取 得的 研 究 成 果 。 据 我 查 证 ， 除 了 文 中 特 别 加 以 标 注 和 致 谢 的 地 方 外 ， 论 文 中 不包 含 其 他 人 已 经 发 表 或 撰 写 过 的 研 究 成 果 ， 也 不 包 含 为 获 得 其 他 教 育 机 构 的学 位 或 证 书 而 使 用 过 的 材 料
2、。 我 承 诺 ， 论 文 中 的 所 有 内 容 均 真 实 、 可 信 。毕 业 论 文 作 者 （ 签 名 ） ： 年 月 日目 录II摘要 .I-II1 前言 .12 实验材料 .42.1 仪器和设备 .42.2 实验试药 .42.3 动物 .53 实验方法 .53.1 高脂饲料的制备 .53.2 分组及建立模型 .53.3 大鼠的给药方法 .53.4 检测指标 .63.5 统计学方法 .64 结果与分析 .64.1 对大鼠的体重和日常行为的影响 .64.2 对大鼠血脂水平的影响 .85 讨论 .12参考文献 .13综述 .15致谢 .22复方山葛降脂胶囊的降脂作用研究III摘要:目的
3、 研究复方山葛降脂胶囊对高血脂模型大鼠的降脂作用。方法 用高脂饲料喂养大白鼠建立大鼠高血脂模型，用复方山葛降脂胶囊低，中，高三个剂量药物溶液给大鼠灌胃给药。连续 8 天，观察并记录各组大鼠的行为及生活状况。用半自动分析生化仪测定高脂血症大鼠中总胆固醇(TC)，甘油三酯(TG)，高密度脂蛋白(HDL-C)，低密度脂蛋白 (LDL-C)的值等生化指标。结果 复方山葛降脂胶囊能显著降低高脂血症大鼠 TC，TG，LDL-C 和升高 HDL-C 的水平。结论 复方山葛降脂胶囊对高脂饮食诱导的高血脂模型大鼠具有明确的降脂作用。关键词：山楂；葛根；何首乌；高血脂大鼠；降血脂Lipid-decreasing
4、effect research of compound shan ge lipid IVlowering capsulesAbstract: abserve lipid-decreasing effect of compound shan ge lipid lowering capsules on hyperlipidemia rats model. Methods After Rat models of high blood lipid level were induced by feeding with high-lipid feedstuff, the rats were adminis
5、trated intragastrically with high does, median does and low does extraction of compound shan ge lipid lowering capsules by eight days Observe and record the status of behavior and life of hyperlipidemia rat ,then the serum was obtained and the total cholesterol(TC), triglyceride(TG) ,lowd ensitylipo
6、protein -cholesterol (LDL-C)and high density -cholesterol(HDL-C) level and other biochemical parameters in serum were measured with semi-automatic biochemistry analyzer. Results compound shan ge lipid lowering capsules could reduces TC,TG,LDL-C level and increase HDL-C level significanty on hyperlip
7、idemia rat. Conclusion compound shan ge lipid lowering capsules shows notable antihyperlipidemia effect on hyperlipidmia rat model induced by high fat diet.Keywords: Hawthorn，KudzuPolygonum，multiflorum，Plasma lipid，Lipid - decreasing11 前言近年来，随着社会的发展和进步，人们生活水平和消费能力不断提高，高热量类食品摄入量显著增加，造成膳食结构不合理，营养不均衡，导
8、致高血压、高血脂病等慢性非传染性疾病的患病率不断上升 1,2。高脂血症是由于人体脂质代谢发生紊乱，血浆内脂质浓度超出正常范围的一种病症，是一种常见的且多发性代谢疾病，与糖尿病、肥胖、脂肪肝以及高血压、动脉粥样硬化等疾病的形成有密切联系。由于脂质多与血浆中蛋白结合，故又称作高脂蛋白血症。临床主要表现为血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG) 和低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C )水平过高或高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C) 水平过低。而高脂血症的并发症发生也更加频繁，由于脂质代谢紊乱，血液中的胆固醇水平，血清甘油三脂水平升高，过多的脂质在血管壁的累积，导致血管内壁粥样硬化斑块的形成，血液流变性发生
9、改变，最终由于动脉粥样硬化引发相关的心、脑血管疾病及糖尿病、高血压等。而这些疾病一旦发生，轻者对人体将是一种长期的威胁，严重者直接导致死亡。据现代医学疾病监控的数据显示，我国每年因高血脂引起的心肌梗死，脑梗死，脑出血，偏瘫，致残，致死人数以每年递增 12% 的速度上升 3 。由于其升高造成对身体健康的伤害，因此高脂血症的治疗及预防作用研究也是当今科学研究的热点之一。是一个严重的社会公共卫生问题，要降低高血压、高血脂病的患病率，必须引起全社会的关注。但目前西药治疗高脂血症存在毒性太大，价格昂贵的问题,而中医治疗高血脂症有较久的历史渊源，许多中药及中药复方广泛用于高脂血症的治疗及其防治,并且经临床
10、实践证实其疗效显著。因此，中药降血脂作用越来越受到人们的重视。中草药以其疗效确切，不良反应少和多部位，多靶点综合调脂的优势，已成为降脂药物研究的主要方向，近年来随着细胞生物学，分子生物学技术的应用，部分降脂中药的降脂途径，作用环节和药效靶点已逐渐阐明，为降脂中药的开发提供了理论支持 4。 山楂味甘，性微温酸，归脾、胃、肝经。现代药理研究已证明，其能降低血清及动脉中胆固醇和甘油三酯的含量，阻止和减少脂类沉积于血管内壁。而且，中国古代医籍中也有山楂“性善消肉积”，“耗人腹内脂膏”的记载 5。其含山楂酸、维生素 C、黄酮等成分，具有生津止渴，2消积化食，活血化癖，补脾健胃作用。本草纲目说:”山楂化饮
11、食，消肉积、症瘾、痰饮、痞满吞酸、滞血痛胀”。在历史上，山楂在药膳中也有一定地位，唐代名医孙思邀就已将山楂列入”药食同用”果品之中。自古以来，医家常以山楂祛病疗疾，益寿延年。以山楂为药物成分制成的丸、散、片等中成药有几十种。近年来，随着科学技术的进步，现代化精密仪器的使用，一批药学工作者对山楂的果实、叶在生药、药理、化学组成毒理学等方面进行了卓有成效的基础性研究，为开发利用山楂资源奠定了理论基础，提供了科学的数据，特别是对山楂叶化学组成、药效学的研究，有了突破性的进展，对人类肿瘤、衰老、心脑血管等疾病的治疗和预防显示出越来越重要的意义 6。对其化学成分的研究，始见于 1921 年 Anon，其
12、主要成分为苹果酸、维生素 C。果实尚含微量核黄素、胡萝卜素、Ca 2+、P 2+、Fe +等，50 年代以后尚发现山楂中含有对心血管系统有明显的作用，经动物试验证实以 100 肠南山楂浸剂 0.2mL 给兔及蟾赊注射以后，有降压作用，灌注蟾蛛血管证实有血管扩张作用。商品山楂能增加胃消化酶促进消化，向为重要的消导药。山楂叶中提得的黄酮贰混合物 1020mg/kg 给家兔静脉注射，可使加压素所致狭心冠状血管血流增加症的家兔的心电图于 8min 内恢复正常，证明有扩冠强心作用。现代医学研究结果证实山楂可降低胆固醇，提高血中卵磷脂/胆固醇之比，减少器官内胆固醇沉积。Guseinov 用五子山楂醇制剂浸
13、膏 0.5mg /kg 内服证明对动脉粥样硬化的兔能降低血中的胆固醇及脂质在器官上的沉着，并证明五子山楂的总皂贰作动物试验也发现有降低血中胆固醇所致的动脉粥样硬化作用及降压作用 7。山楂的乙醇提取物和总三萜酸提取物可明显降低高血脂症小鼠血清胆固醇和甘油三酯；山楂核醇提取物可降低血清胆固醇、低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白，并能减少胆固醇及胆固醇酯在动脉壁的沉积。我们认为山楂是一种毒性低、副作用少的有效降脂药物之一，尤其对降低血中甘油三脂的效果较胆固醇为佳。葛根，味甘、辛，性凉。归脾、胃经。升阳止泻，解肌退热，透发麻疹，除烦止渴。葛根的药用始载于神农本草经，谓”葛根，味甘，平。主消渴，身大热，呕吐，
14、诸痹，起阴气，解诸毒”。本经：”主消渴，身大热，呕吐，诸痹，起阴气，解诸毒”。别录：”疗伤寒中风头痛，解肌发表，出3汗，开腠理。”“生根汁，疗消渴，伤寒壮热。”葛根的主要有效成分是大豆苷元、大豆苷、葛根素和大豆苷元-4，7-二葡萄糖甙等异黄酮类化合物 8。除这4 种主要的黄酮物质之外，日本学者柴田承二等还从葛属植物 P.Thunbergiana Benth 等品种分离得到葛根素-7-木糖甙;Bhutain 等从葛属植物 P.Tuberosa 中分离得到另一种新的异黄酮类物质-4，6-二乙酰基葛根素; 野原稔弘等还首次从葛根中分离鉴定出金雀黄素-8-芹糖基-葡萄苷和大豆黄素-8-芹糖基-葡萄苷两
15、种异黄酮物质 9,10。葛根主要含黄酮类物质，升高 ApoA，降低 TC、TG，促进脂质的转运和排泄。葛根素能抑制二磷酸腺苷(ADP)诱导和 5-HT(5-羟色胺)与 ADP联合诱导的人和动物的血小板聚集；另外，葛根素还能明显抑制由凝血酶诱导的血小板中 5-HT 的释放，具有抗血栓形成作用。葛根素、葛根甙元在体内分布广且快，消除也快，不易积累，无代谢饱和现象，为临床安全合理用药提供了重要依据 11。葛根当前已被广泛地应用于心血管疾病与内分泌代谢性疾病的治疗，而血脂异常就为其中代表之一。何首乌来源于蓼科植物何首乌的干燥块根，本草纲目中称此物气温味苦涩，苦补肾，温补肝，固精益肾，健筋骨，乌发，为滋
16、补良药，不寒不燥，功在地黄、天门冬诸药之上。气血太和，则风虚、痈肿、瘰疬诸疾可知（除）矣常用补益中药 12。中医药认为, 何首乌味苦、涩，性温, 归肝、心、肾经。具有补肝肾, 益精血，乌须发，强筋骨，润便，解毒，养心安神，祛风湿等功效。现代研究表明，何首乌主要含有蒽醌、二苯乙烯苷、磷脂等成分 13，具有降血脂、延缓动脉粥样硬化、抗衰老、提高免疫力、益智等作用，能显著降低血清总胆固醇和三酰甘油，临床用于高血脂症 14。临床上常用这三种中药配伍治疗高血脂症，复方山葛降脂胶囊是将这三种中药提取物以山楂:葛根:何首乌比例为 1:1:0.5 为比例混合制得的一种新制剂。本实验用复方山葛降脂胶囊内容物对其
17、降血脂效果进行研究和考察，一方面可以指导临床用药安全，另一方面也是寻找及开发新型降血脂药物的有效途径，具有重要意义。42 实验材料2.1 仪器和设备2.2 实验试药大鼠基础饲料 穗北实验动物养殖厂； 批号 42000801蛋黄粉 安徽红日食品厂； 批号 20141109猪油 永定县下洋乌木肉制品厂； 批号 20141107辛伐他汀片 杭州默沙东制药有限公司； 批号 H19990366复方山葛降脂胶囊 实验室自制； 批号 20141204山楂提取物 西安清藤生物科技有限公司；批号 20141122ZN17-880A 半自动分析仪 北京中诺远东科技有限公司JA2003 型电子天平 上海恒平科学仪器
18、有限公司SPS601F 型便携式电子天平 南京华奥仪器有限公司TGC-16G 台式离心机 上海安亭科学仪器厂KQ-500 型超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司GZX-9240MBE 型数显鼓风干燥箱 上海博讯实业有限公司医疗设备厂HWS24 型电热恒温水浴锅 上海恒科有限公司半自动胶囊板 中诚制药机械厂大龙移液枪 深圳博大精科有限公司大鼠饲养笼 上海艾研生物科技有限公司电动剃刀 义乌市科美家用电器有限公司5葛根提取物 西安清藤生物科技有限公司；批号 20141017何首乌提取物 西安清藤生物科技有限公司；批号 20141017TC 测定试剂盒 上海信裕生物工程有限公司；批号 20140906
19、TG 测定试剂盒 上海信裕生物工程有限公司；批号 20140811LDL-C 测定试剂盒 上海信裕生物工程有限公司；批号 20140906HDL-C 测定试剂盒 上海信裕生物工程有限公司；批号 20140811蒸馏水 实验室自制2.3 动物 Wistar 大鼠，穗北实验动物养殖厂，雄性，体重(220240)g，实验动物合格证号 SCXK(粤)2011-0015。3 实验方法3.1 高脂饲料的制备用按 70%的基础饲料与 15%的猪油，15%蛋黄粉配比将三者混匀，制成高脂饲料。3.2 分组及建立模型取 Wistar 雄性大鼠 24 只，体重 220240g，将大鼠适应性饲养 3 天之后，随机分为 6 组：正常对照组、高脂模型组、阳性辛伐他汀组、复方山葛降脂胶囊高、中、低剂量组，每组 4 只。每组大鼠自由饮水，除正常对照组喂基础饲料外，其余 5 组均给高脂饲料，一直饲养养至给药物结束 15。3.3 大鼠的给药方法药物高剂量组，药物中剂量组，药物低剂量组，辛伐他汀组分别给予复方山葛降脂胶囊药物内容物溶液的高剂量（浓度 1.2g/mL），中剂量（浓度
