目的基因的获取(共6页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上实验报告 题目:单元一:目的基因的获取 指导老师:谭红铭 张添元 日期:2013/10/17一实验目的：(1) 掌握总RNA的提取方法和技术(2) 了解总RNA的提取要注意的问题(3) 了解用RT-PCR法获取功能基因的原理(4) 学习和掌握RT-PCR的技术方法二实验原理：(1) RNA提取：RNA在细胞中是与蛋白质结合在一起的。提取RNA时需先用强变性剂使蛋白质和DNA变性，同时抑制核糖核酸酶(RNase)的活性，然后通过有机溶剂如氯仿分层抽提去掉蛋白质和多糖等，最后通过RNA沉淀剂如异丙醇的帮助下沉淀分离RNA。(2) RT-PCR：总RNA中的mRNA体外在反转录酶的作用下可合成与mRNA互补的单链DNA，称为互补DNA（cDNA），再在DNA聚合酶的作用下，以cDNA第一链为模板，以四种脱氧核苷酸（dNTP）为材料，在引物的引导下，合成大量双链DNA。三实验材料： 斑马