精选优质文档-倾情为你奉上顶扣包埋：单层细胞透射电镜制样细胞透射电镜样品的制备最常见的方法是先把贴壁的细胞酶解下来，然后离心成团，最终是对细胞团进行固定、脱水、渗透、包埋、切片和染色，最后是电镜观察。然而有些细胞酶解下来时，会造成细胞内超微结构的改变，如贴壁生长的小鼠成纤维细胞细胞核中存在granule，胰酶消化会导致granule（如图一）的消失，这时需要一种原位处理的制样方法，也就是我们要介绍的顶扣包埋单层细胞透射电镜制样方法。图一、小鼠成纤维细胞。箭头所指为Granule有些细胞对切片方向要求比较严格，可以选用顶扣包埋。比如看到气管上皮细胞的纤毛横截面，顶扣包埋会更适用，能在一个视野看到更多纤毛横截面（如图二）。图二、气管上皮细胞纤毛以活体皿（玻璃底）培养细胞为例，介绍顶扣包埋的具体操作方法：1. PBS浸洗一次，10 min；2. 2.5%戊二醛固定，30 min；3. PBS浸洗三次，每次10 min；4. 1%锇酸固定30 min；5. 乙醇梯度脱水；6. 树脂渗透，树脂7. 聚合注
