多肽和KLH偶联(共3页).docx

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精选优质文档-倾情为你奉上MBS/BDB/SMCC/sulfo-SMCC1、SMCC琥珀酰亚胺-4-(N-马来酰亚胺)环已烷-1-1羟酸酯分子一端的NHS酯基团与某一蛋白质分子的伯氨反应形成稳定的酰胺键,另一端(马来酰亚胺基团一端)可与另一蛋白质分子的巯基 交联。NHS活性酯与伯胺在PH7-9的环境形成酰胺键。马来酰亚胺与巯基在PH6.5-7.5的环境下形成稳定的硫醚键。在水溶液中,NHS活性酯的水解是(与氨基的反应)个竞争反应。马来酰亚胺比NHS稳定,但是在PH大于7.5时,马来酰亚胺会慢慢水解,失去与巯基反应的特异性。因而,在使用SMCC时通常是在PH7.2-7.5的环境下进行,并且先让NHS发生反应。SMCC结构里的环己烷环可以降低马来酰亚胺的水解速率。这使得蛋白质在用SMCC修饰之后可以冻干存放一段时间。很多蛋白质都选用该试剂来进行马来酰亚胺修饰。用SMCC来制备抗体-酶或者半抗原作载体的蛋白质,经常采用两步合成法。首先,含有氨基的蛋白质与几倍的偶联剂反应,反应结束后通过脱盐柱或者透析的方法除掉没有反应完的SMCC。然后,再与含有巯基的蛋白质反应。在

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