碱性磷酸酶标记方法(共2页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上碱性磷酸酶标记方法(戊二醛两部法)将100uL碱性磷酸酯酶加入到300uL10mM PBS(pH7.2),再加入40uL 25%的戊二醛,混匀,4摄氏度活化20小时;透析至10mM PBS(pH7.2),24小时,换液4次;将目的蛋白用10mM PBS(pH7.2)配成4mg/mL;将125uL目的蛋白加入活化过的碱性磷酸酶中(终浓度为5000U AP/mg蛋白),混匀,4摄氏度反应24小时。参考文献:A蛋白碱性磷酸醋酶的标记及酶联测试Enzyme Linked Immunosorbent Assay Using Alkaline Phosphatase Conjugated with Streptococcal Protein G 使用200mgAP/mg 蛋白2.5mg AP(50IU/mg),加入200uL含1.25%戊二醛的100mM 的PB(pH6.8),混匀,室温反应过夜;4摄氏度条件下,电磁搅动,透析至50mM PBS(pH7.2),12小时,换液4次;1.5mg目的蛋白溶于100uL 1M

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