血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定(赖氏法)(共3页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上授课对象:06级检验1-5班 课 时:2学时血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定(赖氏法)目 标:1.掌握赖氏法测血清ALT的原理及注意事项 2.掌握试剂的配制熟练地制作标准曲线 3.规范地进行ALT测定 4.了解血清ALT测定的临床意义实验用品:配制试剂用的各种器皿(烧杯、容量瓶、电炉、分析天平等)、37水浴箱、 721型风光光度计、坐标纸等 原理:丙氨酸和-酮戊二酸在血ALT的作用下生成丙酮酸及谷氨酸,在酶反应达到规定时间时,加入2.4-二硝基苯肼-盐酸溶液以终止反应。生成的丙酮酸与入2.4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸入2.4二硝基苯腙,苯腙在碱性条件下显红棕色。根据显色之深浅,求得血清中丙氨酸氨基转移酶活力。试剂:1. 0.1molPH7.4磷酸盐缓冲液 称取磷酸氢二钠(Na2HPO4 AR)11.928g,磷酸二氢钾(KH2PO4 AR)2.176g,加少量蒸馏水溶解并稀释至1000mL。2. ALP基质液 称取DL丙氨

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