PCR实验室发生污染后处理方法(共3页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上PCR实验室发生污染后处理方法1、 确定污染类型1、PCR实验室发生污染后主要表现为:1)所有同批次标本及阴阳对照全部为阳性;2) 阴阳对照正常,所有标本检测均为阳性;3) 除了CT值靠前的标本其余标本及阴性对照CT值接近临界值,都有微弱翘尾。出现以上三种情况,均可判为发生污染。PCR污染类型分为样本污染和产物污染。所谓样本污染一般发生在操作2区,由使用被污染的耗材和样本交叉污染产生;产物污染有PCR扩增产物引起,一般发生在扩增分析区,即3区,由于PCR反应体系没有完全闭合或者扩增后的体系没有及时安全清理引起。2、 确认污染类型才能有效清除污染。发生污染后,更换所有一次性耗材即移液枪及使用新拆分试剂。有两种简易方法如下:1) 不加内标重复实验,检测结果如果内标没有扩增,可判为样本污染,反之为产物污染。2) 分A和B两组,A组在上机前,八联管开盖在2区放置10min左右,B组闭合八联管直接上机。检测结果中若A组发生污染B组正常,则为气溶胶污染。气溶胶污染有两个来源,其一为扩增产物引起,其二为浓度较高的标本在制备

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