精选优质文档-倾情为你奉上-淀粉酶的提取、分离及测定(生化试验小组-2005.4)试验全程安排:第一天样品的粗处理及粗分离,包括:1) 样品处理2) 离子交换色谱分离3) 紫外检测(紫外测定蛋白),绘出色谱图4) 收集样品第二天对各峰收集样品进行分析,包括:1) 精确测定蛋白含量(Folin-酚)2) 测定酶活3) 比活计算第三天对活性峰及原液进行分析及鉴定,包括:1) SDSPAGE分析(分子量分析)2) 纯化倍数计算等试验一、色谱分离淀粉酶1.1 试剂及设备离子交换树脂-20冰箱样品管(5-10ml试管)1.5ml离心管紫外分光光度计-淀粉酶样品秒表胶头吸管(进样用)平衡缓冲液(pH8.0,0.01M磷酸盐缓冲液)洗脱缓冲液(平衡缓冲液+0.1M,0.3M,0.5M,1.0M的氯化钠)试剂瓶1.2 离子交换色谱原理与方法色谱(chromatography)是一种分离的技术,随着现代化学技术的发展应运而生。20
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