1、本科毕业论文（20 届）无患子的质量标准研究所在学院 专业班级 中药学(中药分析与鉴定方向) 学生姓名 学号 指导教师 职称 完成日期 年 月 诚 信 声 明我声明，所呈交的毕业论文（设计）是本人在老师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我查证，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文（设计）中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。我承诺，论文（设计）中的所有内容均真实、可信。毕业论文（设计）作者（签名）： 年 月 日目 录摘要 .-1 前言 .12 材料与仪器 .22.1 材料 .22 .2 仪器 .23 实验方法 .33.1 无患
2、子粉末显微特征 .33.2 无患子薄层色谱鉴别 .43.3 无患子水分测定 .43.4 无患子总灰分测定 .43.5 无患子浸出物测定 .44 结果 .54.1 无患子粉末显微特结果 .54.2 无患子薄层色谱结果 .74.3 无患子水分测定结果 .94.4 无患子总灰分测定结果 .104.5 无患子浸出物测定结果 .105 讨论 .115.1 其他薄层板考察情况 .115.2 酸不溶性灰分考察情况 .125.3 实验研究总结 .13参考文献 .15综述 .16致谢 .23I无患子的质量标准研究摘要:目的 无患子为无患子科无患子 Sapindus mukorossi Gaertn 的干燥果实，
3、无患子具有清热祛痰、消积杀虫之功效，主治喉痹肿痛、肺热咳喘、疳积、癣疾、肿痛等，民间多用其果实代肥皂用。目前有许多医院和企业都有应用到无患子这种中药制作药物用于治疗疾病。本次研究的目的是建立可靠的无患子质量标准，使在对此药物进行检验的时候有可靠的标准进行参考及操作；方法 本次研究采用对粉末显微特征的观察，药材提取物中三萜皂苷的薄层色谱的鉴定，药物水分、灰分、浸出物的标准确立这几个方面对无患子这个中药进行质量标准的研究；结果 得出可靠的无患子质量标准的相关实验结果与数据；结论 本论文的无患子质量标准研究方法可供以后药物检验参考使用。关键词：无患子；三萜皂苷；显微特征；薄层色谱IIStudy on
4、 Sapindus mukorossi GaertnAbstract: Objective Sapindus mukorossi Gaertn is belong to the Sapindaceae plant. Sapindus have the function of heating expectorant, consumer product insecticidal efficacy, indications Houbi throat, Hyperactivity cough, malnutrition, ringworm disease, pain and so on. This q
5、uality standard research will study on Sapindus mukorossi Gaertn to establish standards of itself. Methods This quality standard study will use the Microscopic identification, TLC and the Determination of moisture, ash, extract to establish standards of Pyracantha fortuneana (Maxim.) Li. Results Obt
6、ain reliable standard quality-related data and results. Conclution This quality standard research methods are available for future use and reference drug testing.Keywords: Sapindus mukorossi Gaertn，Microscopic identificatio， TLC，Determination of moisture, ash, extract11 前言无患子(Sapindus mukorossi Gaer
7、tn)为无患子科无患子属的一种落叶大乔木，其中又患子，油患子，黄目树，洗手果，目琅树，苦患树，油萝树等都是无患子的别名。我国长江流域以南地区及台湾省无患子的主要分布地区，同时无患子在也朝鲜、日本、印度等地区有栽培。同时有研究发现无患子植株能够对二氧化硫有比较好的抵抗能力 1。因此在工业城市的生态绿化项目中无患子一般都是优先选用的树种之一。56 年是无患子植株一般的成长期，它通常是一年结果一次，并且无患子植株生长速度比其他树种都要快，因此它是属于易以种植养护的树种。无患子属于一种寿命长的数木，以为内它的寿命一般有100200 年。无患子在中医中药学中归为寒凉，它的味道比较苦，也具有一点毒性。它具
8、有的药效表现为清除湿热祛除痰脓、帮助消化杀灭寄生虫，因此在治喉咙麻痹肿痛、因肺热引起的咳嗽、皮肤肿毒、癣疾等病症的时候也会使用到无患子。在市场上很多时候都会用无患子果实代替肥皂来使用，而且现在有不少医院和企业都有应用到无患子这种中药制作药物用于治疗咳嗽等疾病。但可惜的是目前还没有确定的无患子质量标准，因此建立可靠的无患子质量标准，有助于对无患子制成的药物或日用品进行检验的时候有可靠的标准进行参考及操作。无患子的种仁含有丰富的油脂，可以作为一种制备生物柴油的新型原料2。无患子皂苷是无患子果皮化学成分中主要组成部分，它的总含量一般约为533 J3。电喷雾串联质谱法、高效液相色谱一质谱联用法是李锐等
9、研究对无患子总皂苷中不同成分进行分析的时候采用的方法，三萜皂苷是经过研究最后确定为无患子中主要成分，同时存在倍半萜皂苷，四环三萜皂苷类大戟烷型，五环三萜皂苷类的齐墩果酸型和达玛烷型等物质 4。后来一种以前没被发现的的无环倍半萜在 SUN 等 5的研究从无患子果皮中分离得到了。再后来sapinmusaponins A，B,C,D,E 共五种新的没被发现的达玛烷型三萜皂苷也同时在 KUO 等的研究中从无患子果实中分离得到，同时研究也发现对肿瘤细胞具有细胞毒性并且起到抑制肿瘤细胞作用的为其中的 A、C、D、E 这四种达玛烷型三萜皂苷 6。K，L，M,N 等 4 种新的齐墩果酸型三萜皂苷、sapinm
10、usaponins 2F,G,H,I,J 共 5 种新的大戟烷型的三萜皂苷、O，P 2 种新的达玛烷型的三萜皂苷叶都在 HUANG 等的研究中从无患子果实中分离出来了，其中对肿瘤细胞具有细胞毒性并且起到抑制肿瘤细胞作用的是以常春藤皂苷元为苷元的 10 种齐墩果酸型的三萜皂苷，同时在研究发现具有抗血小板聚集效果等药理学作用的是大戟烷型三萜皂苷 7。目前市场上尚未有关于检查无患子质量的明确的标准，这往往使市场上的用无患子制作的医药产品出现质量参差不齐，轻则影响疗效，重则可能会对服用药物的人造成不良的健康问题。故建立可靠有效的无患子质量标准是十分迫切及必须的。一旦建立起可靠的无患子质量标准，就可以有
11、助于对市场上此类产品的质量标准进行规范及监督。2 材料与仪器2.1 材料无患子的果实是类球形的，它的直径一般为 2-2.5 厘米。无患子外果皮颜色呈棕褐色，在晒干后果皮会皱缩同时出现蜡状的光泽；柔韧的肉质，甚至黏稠如胶一般是无患子的中果皮的特点；在质地为膜质，不完全透光的内果皮的表面种子着生的地方有着白色的绒毛。无患子种子较为光滑，表面黑色，种皮为骨质，没有假种皮，种子呈线形种脐。种子有两枚肥厚，叠生的子叶，颜色为黄色，背面较大的一枚半抱腹面的另外一枚；种子的稍弯曲而且粗短 8 。根据收集到的样品 5 批，性状按实际样品进行描述，描述特征如正文。表 2-1 样品表序列号 药材名称 药材批号 出
12、产地方 样品采样时间1 无患子 20140516 广东 2014 年2 无患子 20140610 广东 2014 年3 无患子 20140225 广东 2014 年4 无患子 20140630 广东 2014 年5 无患子 20140311 广东 2014 年2.2 仪器粉末显微特征鉴别用仪器：生物显微镜（型号：C020172)薄层色谱所用的3仪器：普通硅胶 G 预制板（德国默克有限公司制作，批号：604115，规格：100*200mm） ，普通硅胶 G 预制板（青岛海洋化工厂分厂制作，批号：20081211，规格：100*200mm） ，人工手铺普通硅胶 G 板（规格：100*200mm）
13、，佳能照相机，半自动点样器（型号：Linmat 5） ，层析缸；水分，灰分等质量标准所用仪器：电热恒温干燥箱（型号：DG20-02） ，METTLER TOLEDO 电子天平，马弗炉（型号：TM0910 ） ，坩埚若干,扁形称量瓶若干；3 实验方法3.1 无患子粉末显微特征收集到的样品 5 批进行实验，并用采集无患子对照药材进行比对与实验。根据收集到的样品 5 批进行粉末的显微鉴别特征进行描述。3.2 无患子薄层色谱鉴别本次标准研究的薄层鉴别是三萜类进行研究 9，硅胶 G 板为实验用薄层板，点样时供试品溶液与对照品药材溶液点样量为 5l，以三氯甲烷-甲酸乙酯-甲醇-水（15：40：22：10）
14、的展开比例混合后将溶液在温度为 10以下的条件下静置再拿下层溶液作为展开剂使用，显色剂是 10%硫酸乙醇溶液，在温度为105下烘五分钟至斑点显色清晰，在日光下观察。实验如下：3.2.1 供试品溶液的制备取无患子粉碎后过四号筛的粉末 1g，加入 10ml 乙醇，在常温下超声提取30 分钟，过滤后取滤液，滤液水浴蒸干，用 2ml 的乙醇溶解残渣，作为供试品溶液。3.2.2 对照品溶液制备称取无患子果对照药材 1g，按照上面提取的方法制成无患子对照药材溶液。43.2.3 薄层色谱点样量考察取供试品溶液，分别以 2、5、10、15、20l 的点样量进行实验，再用显色剂 10%硫酸乙醇溶液喷板，然后在
15、105下烘 5 分钟至斑点显色清晰检视。3.2.4 薄层色谱湿度考察取供试品溶液和对照品溶液点样于同一薄层板，分别在用硫酸调节相对湿度 18和 88的条件下展开，再用显色剂 10%硫酸乙醇溶液喷板，然后在105下烘 5 分钟至斑点显色清晰检视。3.2.5 薄层色谱温度考察取供试品溶液和对照品溶液点样于同一薄层板，分别在温度为 5和 19的条件下展开，再用显色剂 10%硫酸乙醇溶液喷板，然后在 105下烘 5 分钟至斑点显色清晰检视。3.2.6 薄层色谱薄层板考察取供试品溶液和对照品溶液点样于不同牌子的普通硅胶 G 板，再用显色剂10%硫酸乙醇溶液喷板，然后在 105下烘 5 分钟至斑点显色清晰
16、检视。3.3 无患子水分测定2010 板中国药典一部中水分测定的第一法是本次实验选用来测定无患子水分的方法，取无患子供试品 2g 左右,在干燥至恒重的扁形称量瓶中平铺为厚度不超过 5mm 的薄层,再在电子天平中精密称定扁形称量瓶与粉末的总重量，然后在 105条件打开瓶盖干燥 5 小时，在取出前将扁形称量瓶的瓶盖盖好，并迅速将其移置干燥器中，再干燥器中冷却 30 分钟后，迅速把装有样品的瓶子取出置于电子天平中精密称定。再在温度为 105条件干燥 1 小时，待冷却后如上述的方法称重，直到连续两次称重的差异不超 5mg 为止。根据瓶加样品称重的结果与恒重的扁形称量瓶的质量相减得出减失的重量，用减失的
17、重量除于粉末的质量最后计算出供试品中水分的含量（） 1053.4 无患子总灰分测定2010 板中国药典一部中总灰分测定的方法是本次实验选用来测定无患子总灰分的方法，取粉碎后能通过二号筛的无患子粉末，取混合均匀的无患子供试品 3g 左右，将粉末放入已经做恒重处理的坩埚之中，在电子天平中称量粉末与坩埚的总质量，再将其置于马弗炉内缓缓炽热，同时注意避免粉末在坩埚中燃烧起来，直到粉末被灼伤至完全碳化之后，再逐渐升高马弗炉温度到 600，灼烧 6 小时使无患子样品得到完全灰化，再测量残渣与坩埚的重量。再在温度为 600的马弗炉中灼烧 6 小时，待冷却后如上述的方法称重，直到连续两次称重的差异不超 5mg
18、 为止。根据残渣重量与坩埚的重量减去坩埚恒重的质量，得出的差值除与供试品粉末的质量用于计算无患子总灰分的含量（） 113. 5 无患子浸出物测定2010 板中国药典一部中浸出物含量测定中的热浸法是本次实验选用来测定无患子浸出物含量的方法，取供试品粉末约 2g 左右，在电子天平上精密称定粉末的质量，再将粉末放入 250ml 的磨口锥形瓶里面，用吸量管精密取稀乙醇100ml 并加入进磨口锥形瓶之中，用塞子塞好，在电子天平中称定它的重量，常温下静置大约一个小时后，将其连接到回流冷凝管上，用电热套加热至液面沸腾，调节电热套使锥形瓶中的液体并保持微沸状态一个小时左右。一小时后关闭电热套使瓶内液体放冷，待用液体冷却后取下锥形瓶，用塞子塞好，再在电子天平中称定重量，用胶头滴管吸取稀乙醇加入瓶内补足加热时所失去的乙醇重量，充分摇匀后在干燥滤器过滤，用 25ml 的移液管精密量取滤液 25ml，再将移取的滤液加入干燥至恒重的蒸发皿里，在水浴锅中蒸干，蒸干后再于105的恒温箱中干燥 3 小时，最后取出蒸发皿将其放入干燥器中冷却 30 分钟，之后迅速它的重量。除非另外做规定，一般是用干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量（） 124 结果
