1、本科毕业论文（20 届）猫须草和石见穿的生药学对比研究所在学院 专业班级 中药学(中药分析与鉴定方向) 学生姓名 学号 指导教师 职称 完成日期 年 月 诚 信 声 明我声明，所呈交的毕业论文（设计）是本人在老师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我查证，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文（设计）中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。我承诺，论文（设计）中的所有内容均真实、可信。毕业论文（设计）作者（签名）： 年 月 日目 录摘要 .-1 前言 .12 材料与仪器 .22.1 药材与试剂 .22.2 实验仪器 .23 方法与结
2、果 .23.1 薄层色谱鉴别 .23.1.1 展开剂的考察 .33.1.2 提取溶剂的考察 .43.1.3 提取方法的考擦 .53.1.4 点样量的考察 .63.1.5 提取时间的考察 .63.1.6 预平衡和预饱和方式的考察 .73.1.7 展开温度和湿度的考察 .73.1.8 展开距离的考察 .93.1.9 结果 .93.2 粉末显微鉴别 .103.2.1 猫须草粉末性状 .103.2.2 石见穿粉末性状 .114 讨论 .11参考文献 .13综述 .14致谢 .20I猫须草和石见穿的生药学对比研究摘要：目的 建立使用薄层色谱法及显微鉴别法对比区分猫须草和石见穿的的方法。方法 对猫须草和石
3、见穿进行薄层色谱、粉末显微鉴别的对比研究，采用单因素试验方法，筛选出最佳的薄层色谱条件；找出粉末显微特征。结果 该薄层色谱鉴别条件吸附剂：硅胶 G 薄层板；展开剂：正己烷 :乙酸乙酯:甲酸（7:6:0.4）；溶剂：甲醇；提取方法：超声处理 30 分钟；紫外光 365nm 下检视；石见穿粉末显微可观察到众多石细胞。结论 所得薄层色谱斑点清晰，分离度高，重现性好，简便；显微镜下特征较容易分辨；可用于猫须草和石见穿的生药学对比研究。关键词：猫须草；石见穿；薄层鉴别；显微鉴别1Clerodendranthus spicatus pharmacognosy comparative study of Sa
4、lvia chinensisAbstract: Objective Using thin layer chromatography(TLC) and microscopic identification method pharmacognosy comparative study of Clerodendranthus spicatus and Salvia chinensis method. Methods Clerodendranthus spicatus and Salvia chinensis on thin layer chromatography, powder microscop
5、ic identification comparative study, by adopting the method of single factor experiment, selected the best thin layer chromatographic conditions. Find the powder microscopic characteristics. Results The TLC identification condition adsorbent: silica G thin layer plate; An agent: n-hexane: ethyl acet
6、ate: formic acid (7:6:0. 4); Solvent: methanol; Extraction methods: ultrasonic processing 30 minutes; Can be examined under a uv 365 nm；Salvia chinensis can be observed in many stone powder microscopic cells. Conclusion The TLC spots were clear, separating degree is high, good reproducibility, simpl
7、e; Under a microscope, the characteristic is easy to distinguish, can be used in Clerodendranthus spicatus pharmacognosy comparative study of Salvia chinensis.Key words: Clerodendranthus spicatus; Salvia chinensis; Thin layer identification; Microscopic identification21 前言猫须草，学名：Clerodendranthus spi
8、catus（ Thunb.） C. Y. Wu，为唇形科肾茶属植物，别名肾茶、猫须公等。猫须草须全草入药，味甘、淡、微苦，性凉；具有清热利湿，通淋排石的功效，主治急慢性肾炎、膀胱炎、尿路结石、肾结石、胆囊炎、肝炎、肝硬化、高血压、风湿性关节炎、前列腺炎等疾病。尤其对肾结石、尿路结石。胆结石、胆囊炎有特殊疗效，且疗效神奇，被誉为“国际利尿化石药”。民间认为其全草具有利尿、抗菌、消炎、溶石、排石和抗肿瘤作用。随着社会的进步，人们的生活水平日益提高，现代人对健康有了新的认识：“清胜于补”。其意是把人体体内的毒素清除出去,胜于服补药。而“肾茶”能担当起这一重任。人们把“肾茶”戏称为人体内的“清道夫”。
9、猫须草在临床应用方面具有显著的疗效,同时具有健肾利尿的作用,是一种珍贵的药用保健植物. 猫须草具有广阔的研究开发前景，已被开发成多种保健饮品。据中国医学科学院药用植物研究所对猫须草长期毒性试验研究表明:猫须草无毒副作用，对急慢性肾炎、膀胧炎、各种结石、尿路感染、前列腺炎、尿毒症、高血压、风湿性关节炎、口腔异味等疾病都有很好的治疗作用。并能光润皮肤,起到美容美肤作用。石见穿，学名：Salvia chinensis Benth，系唇形科植物花鼠尾草的干燥地上部分，亦名紫参、小丹参、月下红、石打穿、紫丹花、红参根等。性凉，味微苦、辛、平，归胃、肝、肺经，有清热解毒、活血理气止痛、散结消肿等功效。石见
10、穿为临床常用中药,广泛应用于肿瘤、肝炎、胃炎和妇科疾病等,在恶性肿瘤的治疗中,许多医家辩证应用石见穿,取得了良好的效果。现代药理研究也表明石见穿具有抗肿瘤作用。历代典籍均对其功效有记载,认为其“主骨痛,大风痈肿”(本草纲目),“治瘰疬”(江苏药材志),“治噎嗝,痰饮气喘”(苏州本产药材),“活血化瘀、止血、解毒、消肿”(浙江民间常用草药),“活血止血,清热解毒”(安徽中医药),“治黄疸型肝炎,湿热带下,痛经,菌痢,外治面神经麻痹,乳腺炎,疖肿,跌打损伤等”(浙江药用植物志)。该药临床应用广泛,在肝炎、胃炎、妇科疾病等方面疗效确切,在恶性肿瘤的治疗中,许多医家辩证应用石见穿,亦取得良好的效果。3
11、相信在未来的药材市场中，猫须草和石见穿两者都将会越来越被人所认识熟悉，不断地开发，运用到临床和保健等方面。而猫须草和石见穿两种药都属于唇形科植物，干药材外观性状相似，容易混药，仅看外观性状分辨不出，且国家药典中并未收载有猫须草和石见穿这两种药材，没有猫须草与石见穿的鉴别标准，因此本次实验对两种药材进行生药学对比研究。2 材料与仪器2.1 药材与试剂药材：猫须草（广州至信中药饮片有限公司，141101，141201，150101）；石见穿（广州至信中药饮片有限公司，141101，141201，150101）。 试剂：乙醇（天津市富宇精细化工有限公司，AR，20141103），甲醇（天津市富宇精细
12、化工有限公司，AR,20141206），三氯甲烷（天津永大化试剂有限公司，AR，20141216），乙酸乙酯（天津永大化试剂有限公司，AR，20141021），正己烷（天津市富宇精细化工有限公司， AR，20150124），甲酸（天津永大化试剂有限公司，AR，20141128 ）。2.2 实验仪器KQ-50DB 数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），HSYZ-SP 电热恒温水浴锅（上海镜屏仪器有限公司），CAMAG REPROSTAR3 薄层扫描现象系统（CAMAG），CAMAG 紫外箱（CAMAG ），CX41 显微镜（OLYMPUS），QJ-02 多功能粉碎机（上海兆申科技有限公司）
13、，JJ300 精密电子天平（常熟双杰测试仪器厂），硅胶 G 手铺板（玻璃板： 10*20cm）。3 方法与结果3.1 薄层色谱鉴别供试品溶液的制备：取猫须草样品粉末 2g，加入甲醇溶液 30mL，超声处理 30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇溶液 2mL 溶解，作为猫须草供试品溶液。4取石见穿样品粉末 2g，加入甲醇溶液 30mL，超声处理 30 分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇溶液 2mL 溶解，作为石见穿供试品溶液。对照药材溶液的制备：取猫须草对照药材粉末 2g，加入甲醇溶液 30mL，超声处理 30 分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇溶液 2mL 溶解，作为猫须草对照药材溶液。取石见穿对照
14、药材粉末 2g，加入甲醇溶液 30mL，超声处理 30 分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇溶液 2mL 溶解，作为石见穿对照药材溶液。薄层板：硅胶 G 自制板（10*20cm）。点样量：供试品溶液点样 4l，对照药材溶液 4l。展开剂：正己烷:乙酸乙酯:甲酸（7:6:0.4）。展开方式：上行展开。色谱识别：猫须草供试品色谱中，在第一个蓝色斑点之后，有绿色荧光斑点，而石见穿供试品色谱中并无这一斑点。结果如图 1 所示，3 批猫须草和石见穿样品分别在与其对照药材色谱特征斑点相应位置上均显相同颜色的斑点。表明此方法分离度高，重现性好，简便，可用于猫须草和石见穿的对比研究。T:18 RH:60%，硅胶
15、G 手铺板。图 1 猫须草和石见穿薄层鉴别色谱图1 猫须草（20141101）供试品 2 猫须草（20141201）供试品 3 猫须草（20150101）供试品 4 猫须草对照药材 5 石见穿对照药材 6 石见穿（20141101）供试品 7 石见穿（20141201）供试品 8 石见穿（20150101）供试品 3.1.1 展开剂的考察：取猫须草样品粉末 2g，精密称定，置于锥形瓶中，加无水乙醇 30mL，超声处理 30 分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇 2mL 使溶解，作为猫须草供试品溶液。取石见穿样品粉末 2g，精密称定，置于锥形瓶中，加无水乙醇30mL，超声处理 30 分钟，滤过，
16、滤液蒸干，残渣加无水乙醇 2mL 使溶解，作1 2 3 4 5 6 7 85为石见穿供试品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010 年版一部附录 IV B）试验，分别吸取供试品溶液 5l点于同一硅胶 G 薄层板上，分别以（1）环己烷:乙酸乙酯:冰醋酸（20:6:1），（2）正己烷:乙酸乙酯:甲酸（7:6:0.4）为展开剂，展开，取出，晾干，于紫外光 365nm 下检视。结果：展开剂（ 1）（2）所展开的供试品色谱斑点分离度均较好，但展开剂（1）所展开的色谱有拖尾现象，且展开剂（2）展开后的供试品分离度较好，斑点清晰，颜色鲜艳，因而确定正己烷:乙酸乙酯:甲酸（7:6:0.4）为展开剂。3.1.2 提
17、取溶剂的考察：分别取猫须草和石见穿样品粉末，分别按下文所述方法制备供试品溶液，照薄层色谱法试验，分别吸取不同提取溶剂提取的供试品溶液 5l点于同一硅胶 G 薄层板上，以正己烷：乙酸乙酯：甲酸（7:6:0.4）为展开剂，展开，取出，晾干，于紫外光 365nm 下检视。结果如图 2 所示，可见用乙酸乙酯和三氯甲烷作为提取溶剂提取的供试品斑点较少，反映信息也较少，用无水乙醇和甲醇作为提取溶剂提取的供试品斑点较多，反映信息较丰富，分离度好，两种溶剂提取显色的斑点相似，但甲醇提取的供试品溶液斑点又较无水乙醇提取的供试品溶液斑点清晰，故选取甲醇作为提取猫须草和石见穿供试品溶液制备的提取溶剂。供试品溶液制备
18、： ：称取猫须草样品粉末 2g，加无水乙醇 30mL，超声处理 30 分钟，滤过，残渣加无水乙醇 2mL 溶解，作为供试品溶液； ：称取石见穿样品粉末 2g，加无水乙醇 30mL，超声处理 30 分钟，滤过，残渣加无水乙醇 2mL 溶解，作为供试品溶液；：称取猫须草样品粉末 2g，加甲醇 30mL，超声处理 30 分钟，滤过，残渣加甲醇 2mL 溶解，作为供试品溶液；：称取石见穿样品粉末 2g，加甲醇 30mL，超声处理 30 分钟，滤过，残渣加甲醇 2mL 溶解，作为供试品溶液；：称取猫须草样品粉末 2g，加乙酸乙酯 30mL，超声处理 30 分钟，滤过，残渣加甲醇 2mL 溶解，作为供试品
19、溶液；：称取石见穿样品粉末 2g，加乙酸乙酯 30mL，超声处理 30 分钟，滤过，残61 2 3 4 5 6 7 8渣加甲醇 2mL 溶解，作为供试品溶液；：称取猫须草样品粉末 2g，加三氯甲烷 30mL，超声处理 30 分钟，滤过，残渣加甲醇 2mL 溶解，作为供试品溶液；：称取石见穿样品粉末 2g，加三氯甲烷 30mL，超声处理 30 分钟，滤过，残渣加甲醇 2mL 溶解，作为供试品溶液。 T:18, RH:60%, 硅胶 G 手铺板。图 2 猫须草和石见穿薄层鉴别提取溶剂的考察薄层色谱图1 供试品；2 供试品；3 供试品；4 供试品；5 供试品；6 供试品；7 供试品；8 供试品。3.
20、1.3 提取方法的考擦：分别取猫须草和石见穿样品粉末，分别按下文所述方法制备供试品溶液，照薄层色谱法试验，分别吸取供试品溶液 5l点于同一硅胶 G 薄层板上，以正己烷: 乙酸乙酯:甲酸（7:6:0.4）为展开剂，展开，取出，晾干，于紫外光 365nm下检视。结果如图 2 所示，结果超声和加热回流处理方法的色谱斑点差别不大。因此，选用操作简便的超声处理为猫须草和石见穿供试品溶液制备的提取方法。：称取石见穿样品粉末 2g，加甲醇 30mL，超声处理 30 分钟，滤过，残渣加甲醇 2mL 溶解，作为供试品溶液；：称取猫须草样品粉末 2g，加甲醇 30mL，超声处理 30 分钟，滤过，残渣加甲醇 2mL 溶解，作为供试品溶液；：称取猫须草样品粉末 2g，加甲醇 30mL，加热回流 30 分钟，滤过，残渣加甲醇 2mL 溶解，作为供试品溶液；：称取石见穿样品粉末 2g，加甲醇 30mL，加热回流 30 分钟，滤过，残渣加甲醇 2mL 溶解，作为供试品溶液。
