精选优质文档-倾情为你奉上鸡胚成纤维细胞原代培养实验材料、用品鸡胚：9-11日龄器材：平皿、倒置显微镜、二氧化碳培养箱、离心机、天平、离心管、100目不锈钢网、镊子、眼科小剪、细胞计数器、枪头、移液器等。试剂：Hanks液、完全培养液、血清、碘酒、酒精方法1取胚：取9-11日龄鸡胚，碘酒、酒精消毒气室部，去除气室部蛋壳，用无菌小镊取出鸡胚于无菌平皿中。2去头、爪、内脏，鸡胚组织Hanks液洗2次，除去红细胞，剪成1mm3组织块，用Hanks液洗2次,800rpm3min,去上清。3加2倍体积胰酶搅拌消化15-30min，分散好的细胞悬液加完全培养基，通过不锈钢筛网，滤液离心，沉淀加完全培养液,分散。4细胞计数，接种培养与分装：取单细胞悬液少量，进行1：5或1：10稀释后计数，然后调至细胞浓度为1x106ml。细胞计数方法：取细胞悬液，计数4角4个大方格细胞总数，用下式计数：培养细胞的活性检查材料 1细胞 2 0.4 % w/v trypan blue、75%乙醇。 3培养瓶，无菌
