精选优质文档-倾情为你奉上 合理选择耐热DNA聚合酶是PCR成败与否的一个关键因素，如何选择最合适的耐热聚合酶，是进行PCR实验首先要考虑的问题。目前市面上有许多耐热DNA聚合酶，虽然名称各不相同，但主要区别在于特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段长度等几个指标。 Taq DNA聚合酶 存在于水生嗜热菌(Thermus aquaticus)的嗜热DNA聚合酶，可在74复制DNA，在95仍具有酶活力。该酶可在离体条件下，以DNA为模板，延伸引物，合成双链DNA。这个酶只有53DNA聚合酶活性和53的外切酶活性，缺少35的外切酶活性，即具有5-3DNA聚合酶活性和对双链DNA特异的5-3外切核酸酶活性，无3-5外切酶活性。使用该产品扩增得到的PCR产物的3末端附有一个“A”碱基，可直接用于TA克隆。由于不具有3-5外切酶活性，因而在合成中对某些单核苷酸错配没有校正功能。 TaqDNA聚合酶还具有非模板依赖性活性，可将PCR双链产物的每一条链3加入单核苷酸尾，故可使PCR产物具有3突出的单A核苷酸
