精选优质文档-倾情为你奉上详解Trizol提取RNA原理、步骤和注意事项Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，采用变性剂即内含异硫氰酸胍酚和-巯基乙醇等变性物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶。异硫氰酸胍属于解偶剂，是一类强力的蛋白质变性剂，可溶解蛋白质，并使蛋白质二级结构消失，细胞结构降解，核蛋白迅速与核酸分离。-巯基乙醇主要破坏RNase蛋白质中的二硫键。（一）试剂准备1Trizol试剂。2氯仿3异丙醇475%乙醇（DEPC水配制）5DEPC水细胞裂解后，细胞释放出蛋白质、DNA、RNA等物质，再根据它们在不同的PH值和不同极性溶剂的溶解度不同而使得分开。（二）操作步骤1 样品处理：（1）细胞：1）悬浮细胞：移入1.5ml离心管中，1200转，离心5min，弃上清，PBS洗，重复两次，最后弃，加入1ml Trizol，混匀，室温静置5min。）贴壁细胞：PBS洗两次，最后弃，加入1ml Trizol，混匀，室温静置5min。（2）组织：取50-100mg组织（新鲜或-70
