精选优质文档-倾情为你奉上【目的】：掌握BCA法测定蛋白质浓度的原理。【原理】：BCA(bicinchonininc acid)与二价铜离子的硫酸铜等其他组成的，混合一起即成为苹果绿，即BCA工作试剂。在碱性条件下，BCA与蛋白质结合时，蛋白质将Cu2+还原为Cu+，一个Cu+螯合二个BCA分子，工作试剂由原来的苹果绿形成紫色复合物，最大光吸收强度与蛋白质浓度成正比。【操作】标准曲线的绘制：取试管七支、编号，按下表操作：【计算】（一） 绘制标准曲线。（二） 以测定管吸光度值，查找标准曲线，求出待测血清中蛋白质浓度(g/L)。（三） 再从标准管中选择一管与测定管光密度相接近者，求出待测血清中蛋白质浓度(g/L)。【优缺点】(一) 操作简单，快速，45分钟内完成测定，比经典的Lowary法快4倍且更加方便；(二) 准确灵敏，试剂稳定性好，BCA试剂的蛋白质测定范围是20-200g/ml，微量BCA测定范围在0.5-10g/ml。(三) 经济实用，除试管外，测定可在微板孔中就进行，大大节约样品和试剂用量；(四) 抗试剂干扰能力比较
