精选优质文档-倾情为你奉上吖啶橙染色法检测细胞凋亡实验试剂、仪器: 吖啶橙,稀释液PBS(磷酸缓冲液pH7.07.2),1吖啶橙贮存液,细胞爬片,载玻片,盖玻片,荧光显微镜。 吖啶橙:3,6(二甲胺基)吖啶盐酸盐,分子式C17H19N3 HCl ZnCl2, 分子量438.12g/mol,是一种荧光色素,其检测激发滤光片波长488nm,阻断滤光片波长515nm。它与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光,与DNA结合量少发绿色荧光,与RNA结合量多发桔黄色或桔红色荧光。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。因此,在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光,或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙染液有毒,操作时要戴手套,需避光。 实验步骤:1. 配置吖啶橙贮存液(1%):300mg吖啶橙溶解于30ml PBS缓冲液中,滤过,4度避光保存。2