基于OPA反应的水解度反应的水解度((DH)测定方法(共2页).docx

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精选优质文档-倾情为你奉上基于OPA反应的水解度反应的水解度(DH)测定方法1定义: 水解度(DH)的定义是被水解的肽键数的百分比。 DH 水解的肽键数 100% h *100% 总肽键数 htot htot取决于原料的类型。h则是丝氨酸氨基毫摩数的函数。 h=(serine-NH2 )/ mmol/g protein 对于大多数食物蛋白而言,氨基酸的平均分子量是125g/mol,则htot约为8,也即每Kg蛋白约含有8摩的肽键。 一些常见的蛋白质的、和htot 值见表1。 2原理: 每水解一个肽键便会释放出一个游离胺基。游离胺基与OPA(邻苯二甲醛)反应形成一种黄色络合物。可用分光光度计在340nm下测量其吸光度。 3设备: A.1 容量瓶(100mL, 200mL, 500mL)A.2 试管(10mL) B. 分析天平,精确至小数点后四位 C. 磁力搅拌器 D. 分光光度计,可以在340nm下工作 4试剂: OPA试剂:

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