石蜡切片、HE、免疫组化步骤(共5页).docx

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资源描述

精选优质文档-倾情为你奉上石蜡切片、HE、免疫组化实验一:取材及石蜡切片的制作(本次取材为小肠、膀胱、子宫、宫颈)取材:小鼠脱颈处死后,应立即找到自己所需的组织器官,用一张滤纸将所需器官放在其上(可以加一些生理盐水在上面,防止干了),修去多余的脂肪、系膜等不要的组织,根据不同器官切成合适大小的形状(如小肠应切成1cm长度的长柱形)。将切好的组织装于冻存管中,加入4%的PFA(PFA的作用是保护蛋白,防止蛋白降解)固定过夜(固定时间不能超过24h,如果24h后不能完成脱水工作,可以先50%、70%酒精脱水后,置于4冰箱保存。)脱水(目的是为了使组织从水相置换到有机相)(根据不同的组织,脱水时间不同):将PFA中的组织取出,放入组织盒(组织盒子应尽量选择小格子,防止组织脱水过程中掉出来),一个组织盒可以放48个组织小块,切一张与格子大小合适的纸条一并装入,做好标签,防止后期辨认不出具体组织(只能用铅笔写,中性笔会被酒精脱去)。使用自动脱水机进行脱水,设定程序为:酒精50%、70%、80%、90%(各20min)、无水乙醇(30min/次,两次)、酒精二甲苯混

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