小鼠腹腔巨噬细胞制备及提取(共1页).docx

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精选优质文档-倾情为你奉上小鼠腹腔巨噬细胞制备及提取实验动物: 6-8周的SPF级雄性BALB/C小鼠 ,小鼠取细胞前三天每天腹腔注射0.5-1mL淀粉肉汤,或者取细胞前一小时注射1mL淀粉肉汤。试剂:75% 乙醇、RPMI 1640 (Gibcol/BRL,美国)、含10%小牛血清RPMI-1640液(10%牛胎血清、青霉素100U/ml、链霉素10g/ml)步骤:1、取6周左右的小鼠,剃去腹部的毛并消毒。2、引颈杀死动物,手提鼠尾将全鼠浸入75%酒精中35秒。3、倒立小鼠,置动物于解剖台上,固定四肢,75%酒精擦洗腹膜壁后,用9号针头5ml注射器沿腹中线将预冷的不含小牛血清的PBS 5mL注入腹腔中,同时从两侧用手指揉压腹膜壁,令液体在腹腔内充分流动。轻轻按摩腹部2-3分钟,静置5-7分钟。4、无菌条件下,剪开腹壁,双手持镊撕开皮肤拉向两侧,暴露出腹膜,但勿伤及腹膜壁。再用75%酒精擦洗腹壁。5、用针头轻轻挑起腹壁,使动物体微倾向一侧,使腹腔中液体集于针头下吸入注射器内。小心拔出针头。把液体注入50ml离心管中。再用同样容量的PBS

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