精选优质文档-倾情为你奉上粪便细菌DNA的提取1. 0.2-0.5g粪便置于Ep管中（冰水浴），加入1mlPBS，漩涡振荡混匀，200xg离心5min，取上清，冰水浴；2. 向沉淀中加入1mlPBS，重复步骤1；3. 混合两次上清，用300g离心5min，弃沉淀；4. 两次上清用10000rpm离心8min，沉淀菌体；5. 所得沉淀用1mlPBS洗涤至上清无色；6. -20过夜；7. 向Ep管中加入500ulDNA提取液，6ul蛋白酶K，37摇床160rpm摇40min，再加入56ul20%SDS，65条件下水浴2h，每隔15-20min轻摇Ep管；8. 等体积酚/氯仿抽提，8000rpm离心10min，取上层水相，重复两次，除净蛋白；9. 0.6倍体积异丙醇沉淀DNA，12000rpm离心10min（4）；10. 用70%乙醇洗涤DNA沉淀两次，自然干燥；11. 沉淀中加入15ulTE，在37孵育箱中孵育30min。DNA提取液（pH8.0）100mmol/L Tris-HCL100mm
