精选优质文档-倾情为你奉上Vero细胞传代培养实验报告 一、实验原理体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或l:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养。 细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增36次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。 细胞接种23天分裂增殖旺盛,是活力最好时期,称指数增生期(),适宜进行各种试验。二、器材和液体的准备 .细胞培养器材:培养箱、超净工作台、倒置显微镜、25m培养瓶、5ml移液管、1ml枪头;. 细胞培养溶液:配制好的PBS液、DMEM培养液(10%血清)、胰酶溶液。(均已过滤灭菌, 37预热)其他器材及灭菌用品:计时器、无菌手套、75%酒精、镊子、棉球、废液缸。三、实验操作 将长成单层的Vero细胞从二氧化碳培养箱中