酶促反应动力学实验(共4页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上实验 酶促反应动力学蔗糖酶米氏常数的测【目的要求】1了解酶促动力学研究的范围。2以蔗糖酶为例，掌握测定米氏常数(Km)【实验原理】 在酶促反应中，当反应体系的温度、pH和酶浓度恒定时，反应初速度(v)则随底物浓度S的增加而加速，最后达到极限，称为最大反应速度(v)。Michaelis和Menten根据反应速度与底物浓度的这种关系，推导出如下方程： 此式称为米氏方程，式中Km称为米氏常数，按此方程，可用作图法求出Km。方法有：1以vS作图 由米氏方程可知，v=V2时，KmS即米氏常数值等于反应速度达到最大反应速度一半时所需底物浓度。因此，可测定一系列不同底物浓度的反应速度v,以v对S作图。当vV2时，其相应底物浓度即为Km。2以1v对1S作图 取米氏方程的倒数式： 以1v对1S作图可得一直线，其斜率为KmV，截距为1/V。若将直线延长与横轴相交，则该