高效液相色谱法测定化学合成生物多肽的心得(共2页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上多肽类化合物广泛存在于自然界中,其中对具有一定生物活性的多肽的研究,一直是药物开发的一个主要方向。80年代中期至今多肽化学合成技术有很大发展,合成的成品一般是以目标多肽为主的几种结构相似多肽的混合物,对多肽混合物的分离分析及纯度鉴定一直是一个重要问题。本文主要介绍本人在分析多肽类化合物过程中的一些心得和经验. 首先,在色谱柱选择方面,因为多肽的分子量较大(一般在几千到几万),分子量在10000左右的,常用的C18柱分离效果不太好,要选用碳链比较短的色谱柱,如:C8或者C4;填料孔径不能选普通的100埃,要选孔径比较大的如300埃等。分子量在几万或者几十万的,可以选体积排阻色谱,用柱。 其次,在用反相色谱柱时,因为多肽是由氨基酸组成的,流动相选择一般用含0.1%的三氟乙酸水和含0.1%的三氟乙酸乙腈的梯度洗脱。但因为多肽类化合物的紫外吸收较弱,检测波长一般选在200210nm左右,所以空白梯度的基线会往上漂移很多,特别是样品浓度比较小的时候,分析误差较大。考虑乙腈的本底吸收比水大,在梯度洗脱过程中,随着乙腈比例的增大,基线会向上漂。因

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