精选优质文档-倾情为你奉上UNG酶在PCR中的作用UNG酶Uracil-N-glycosylase尿嘧啶-N-糖基化酶(UNG)酶原理:UNG酶的作用原理是选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键,形成的有缺失硷基的DNA链在硷性介质,高温下会进一步水解断裂,从而被消除.UNG酶的最佳活性温度为50,95灭活。作用:为保证PCR结果的准确性,要预防非特异性PCR扩增和污染。常用的措施是使用UNG酶(Uracil-N-Glycosylase)和Taq酶热启动。PCR反应最常见, 最重要的污染物是PCR产物,防污染热启动PCR试剂盒以dUTP取代dTTP,所以PCR产物都是含有dU的DNA链。在PCR开始前增加50的保温步骤,UNG酶即可将反应体系中已有的U-DNA污染物中的尿嘧啶硷基降解,并在随后变性这步的条件下DNA链断裂,消除由于污染DNA产生的扩增,从而保证扩增结果的特异性,准确性。同时UNG酶被灭活,不会再降解新扩增的产物U-DNA。高品质的UNG酶可以消除高达108的U-DNA产物,和热启动Taq酶一同用于建立含有UNG