黄酮类显色鉴别反应 - 生物探索-探索生物科技价值 .doc

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资源描述

1、黄酮类显色鉴别反应盐酸-镁粉反应1、多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇显红紫红色2、少数显蓝、绿色,B 环上有 -OH 或-OCH3 颜色随之加深3、查耳酮、橙酮等无该显色反应;花色素引起假阳性反应钠汞齐还原反应 1、黄酮、异黄酮、二氢黄酮、二氢异黄酮类显红色2、黄酮醇类显黄色淡红色;二氢黄酮醇显棕黄色还原反应四氢硼钠还原反应 1、二氢黄酮、二氢黄酮醇被还原显红紫红色2、A 环与 B 环上有一个以上-OH 或-OCH3 取代颜色加深AlCl3 反应 1、络合物多呈黄色,紫外灯显鲜黄色荧光2、4-羟基黄酮醇或 7,4- 二羟基显天蓝色荧光锆盐-杞橼酸反应 1、鉴别黄酮类化合物中 3-或 5-

2、OH 的存在与否,加锆盐生成黄色络合物;2、加入杞橼酸,黄色不减退,有 3-OH 或 3,5-OH;3、黄色减退,无 3-OH 但有 5-OH络合反应FeCl3 反应 1、黄酮类化合物含有酚羟基2、酚羟基数目位置不同呈现紫、绿、蓝等颜色1、黄酮类在氢氧化钠水溶液产生黄橙色1、查耳酮、橙酮在碱液产生红或紫红色;2、二氢黄酮在冷碱液中呈黄色橙色,放置或加热则呈深红或紫红色;3、以上均是二氢黄酮类在碱性条件下开环的原因碱性试剂反应 1、黄酮醇类在碱液先呈黄色,通空气 3-OH 被氧化,溶液转为棕色苯丙素类化合物鉴别显色反应羟基污酸铁反应 1、内酯结构碱性开环,与盐酸羟胺缩合生成异羟污酸,在酸性条件下

3、与 Fe3+络合显红色酚羟基反应1、与 FeCl3 溶液反应产生 绿色 至墨绿色沉淀2、若取代酚羟基的邻,对位无取代,可与重氮化试剂显红色至紫红色Gibbs 反应(2,6- 二氯苯醌氯亚胺)1、碱性条件下内酯水解生成酚羟基,如其对位(6 位)无取代与 Gibbs 试剂反应显蓝色,判断 C6 位是否有取代基Emerson 反应( 4-氨基安替比林和铁氰化钾)1、碱性条件下内酯水解生成酚羟基,如其对位(6 位)无取代与 Emerson 试剂反应显 红色,判断 C6 位是否有取代基醌类化合物颜色鉴别反应Feigl 反应 1、醌类衍生物在碱性条件下加热能迅速与醛类及二硝基苯反应生成紫色化合物无色亚甲蓝

4、显色反应 1、为苯醌类及萘醌类专用试剂,样品在 PC 或 TLC 上呈蓝色斑点,可与蒽醌类化合物相区别Borntrager 反应1、羟基醌类在碱性溶液中颜色改变,加深。多呈橙、红、紫红及蓝色2、该反应与共轭体系的酚羟基和羰基有关与金属离子反应 1、如有 a-酚羟基或邻二酚羟基结构时,则可与 Pb2+、Mg2+等金属离子形成络合物,显橙黄、橙红、紫红、蓝色对亚硝基二甲苯胺反应1、9 或 10 位未取代的羟基蒽醌类化合物,尤其是 1,8-二羟基衍生物,其羟基对位的亚甲基上的氢很活泼,可与 0.1%对亚硝基二甲苯胺吡啶溶液缩合反应产生紫、绿、蓝、灰颜色2、本反应作为蒽醌类的定性鉴别反应,不受其他物质

5、干扰强心苷类化合物颜色反应Legal 反应(亚硝酰铁氰化纳)1、吡啶 23 滴+3%亚硝酰铁氰化纳 1 滴+2mol/L 氢氧化钠 1 滴,反应呈红色并逐渐退去2、凡分子中有活性亚甲基均有此反应Raymond 反应(间二硝基苯)1、50%乙醇+ 间二硝基苯乙醇溶液 0.1ml(摇匀)+20%氢氧化钠0.2ml,呈紫红色2、机制间二硝基苯与活性亚甲基缩合Kedde 反应(3,5-二硝基苯甲酸)1、甲醇+3,5-二硝基苯甲酸 34 滴,产生红色或紫红色2、用于强心苷纸色谱和薄层色谱显色,喷雾后呈紫红色,几分钟后退色C17位上不饱和内酯环的显色反映Baljet 反应(碱性苦味酸)1 加入碱性苦味酸数

6、滴呈橙色或橙红色,反应较慢,通常 15min后才显色KK 反应1、冰乙酸 5ml+20%FeCl3 一滴(摇匀)+浓硫酸 5ml(沿管壁)2、如有 a去氧糖乙酸层显蓝色,其他羟基糖不显色3、反应阳性可肯定 a去氧糖存在Xanthydrol 反应 1、加 Xanthydrol 试剂水浴 3min,如果分子中有 a去氧糖显红色2、此反应极度灵敏,还可用于定量分析对-二甲氨基苯甲醛反应1、样品乙醇液点于滤纸上,喷试剂,90加热 3min,如有 a去氧糖,可显灰红色斑点a去氧糖颜色反应过典酸-对硝基苯胺反应1、喷过典酸试剂,室温 10min,再喷对硝基苯胺,出现深黄色斑点,置紫外灯下为棕色背底出现黄色

7、荧光斑点,再喷 5%氢氧化钠。斑点转为绿色甾体类化合物颜色反应Liebermann-Burchard反应样品溶于氯仿+硫酸-乙酐(1:20) ,产生红-紫-蓝-绿-污绿-退色等颜色变化;在冰乙酸中一样Salkowski 反应 样品溶于氯仿+硫酸,硫酸层显血红色或蓝色,氯仿层显绿色荧光Tschugave 反应 样品溶于冰醋酸+氯化锌+ 乙酰氯加热;或样品溶于氯仿+冰醋酸+乙酰氯+氯化锌煮沸,反应呈紫红- -蓝-绿等变化Rosen-heimer 反应 将样品滴在滤纸上,喷 25%的三氯化锑氯仿溶液加热至 60呈红色至紫色Kahlenberg 反应 将样品滴在滤纸上,喷 20%的五化锑氯仿溶液加热至

8、 60-703min 样品斑点呈灰蓝、灰、灰紫颜色三萜类化合物颜色鉴别反应Liebermann-Burchard反应样品溶于乙酸酐+硫酸-乙酐(1:20)数滴,产生黄-红-紫-蓝-退色等颜色变化Salkowski 反应 样品溶于氯仿+硫酸,硫酸层显红色或蓝色,氯仿层显绿色荧光Tschugave 反应 样品溶于冰醋酸+氯化锌+ 乙酰氯加热,反应呈淡红色或紫红色等变化Rosen-heimer 反应 将样品滴在滤纸上,喷 25%的三氯化锑氯仿溶液加热至 100呈红色,并逐渐变为紫色Kahlenberg 反应 将样品的氯仿或乙醇溶液滴在滤纸上,喷 20%的五化锑氯仿溶液加热至 60-70,样品斑点呈蓝

9、、灰、灰紫等多种颜色三萜类化合物和甾体类化合物颜色鉴别反应大致相同生物碱的沉淀反应很颜色反应碘化铋钾试剂 即 KbiI4,生成橘红色至黄色 无定形沉淀碘化汞钾试剂 即 K2HgI4,生成类白色沉淀碘-碘化钾试剂 即 KI-I2,生成红棕色无定形沉淀硅钨酸试剂 即 SiO212WO3nH2O,生成类白色或淡黄色沉淀苦味酸试剂 即 2,4,6-三硝基苯酚,生成 黄色沉淀,为苦味酸生物碱盐沉淀反应雷氏铵盐试剂 NH4Cr(NH3)2SCN )4 ,生成红色沉淀或结晶Mandelin 试剂 阿托品-红色;奎宁- 淡橙色;吗啡- 蓝紫色;可待因- 蓝色 ;士的宁-蓝紫色;颜色反应Frohde 试剂 乌头

10、碱-黄棕色;吗啡- 紫色转棕色;黄连素- 棕绿色;利血平- 黄色转蓝色Marquis 试剂 吗啡-橙色至紫色;可待因-洋红色至紫色两类鞣质的鉴别反应试剂 可水解鞣质 缩合鞣质1、稀酸(共沸) 无沉淀 暗红色糅红沉淀2、溴水 无沉淀 黄色或橙红色沉淀3、三氯化铁 蓝色或蓝黑色(或沉淀) 绿或绿黑色(或沉淀)4、石灰水 青灰色沉淀 棕色或棕红色沉淀5、乙酸铅 沉淀 沉淀(可溶于稀乙酸)6、甲醛或盐酸 无沉淀 沉淀鞣质的化学性质还原性 酚羟基多,易被氧化,能还原菲林试剂与蛋白质沉淀 结合产生不溶于水的沉淀,作为提纯、鉴别的方法之一与重金属沉淀 沉淀,在提取分离中此方法可除去鞣质与生物碱沉淀 沉淀,在

11、提取分离中此方法可除去鞣质与三氯化铁作用 产生蓝黑色或绿黑色反应或沉淀。制造蓝色墨水与铁氰化钾氨作用 反应呈深红色,很快变成棕色糖类和苷的检识Molish 反应(阳性结果为两液之间出现紫环)1、加 5%a-萘酚乙醇液数滴摇匀,沿试管壁加入浓硫酸,两液之间出现紫环说明组成含有糖或苷类。阳性仅能说明含有游离或者结合的糖;2、与菲林试剂反应、滤液再和 Molish 试剂反应,呈阳性说明存在苷类3、正丁醇萃取液与 Molish 试剂反应,呈阳性说明存在苷类菲林试剂反应多轮试剂反应生成砖红色沉淀,若反应呈阳性说明有还原性糖存在萜类化合物检识三氯化铁反应 与 1%的三氯化铁反应,生成赤色络合物卓酚酮类检识

12、 硫酸铜反应 生成稳定的绿色结晶,可用氯仿重结晶,高熔点Weiggering 反应 产生各种颜色环烯醚萜类检识 Shear 反应 车叶草苷:黄色-棕色- -深绿色Sabety 反应 5%溴的氯仿液,产生蓝、紫 、绿Ehrlich 反应 产生紫色或红色艹奥(Yu)(挥发油)类检识对二甲胺苯甲醛 室温显蓝色,氢化 yu 在 80加热 10min 显蓝色,继而转为绿色,最后转为黄色,在水蒸汽上蓝色可再现硫酸 110出现颜色或荧光五氯化锑 萜醇由灰到紫蓝,加热转为棕色;紫外灯下棕色荧光通用显色剂. 三氯化锑 萜醇由灰到紫蓝,加热转为棕色;紫外灯下棕色荧光2,4-二硝基苯肼 检识醛酮环,无环醛和酮-黄色;环状羰基化合物- -橙红色专属试剂邻联茴香胺 检识醛酮,醛类显黄色至棕色;加热颜色背景均变深

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