农杆菌感受态制作和转化(共1页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上农杆菌感受态制作1. 取保存的菌种，在含相应抗生素的YEB固体培养基上划线，28、培养2436h至长出单菌落。2. 挑取农杆菌单菌落，接种于5ml含有相应抗生素的液体YEB培养基内。28、250rpm培养2436h，至菌液OD600约0.50.63. 按2%体积，将菌液加入含相应抗生素的液体YEB培养基中，28、250rpm培养至OD600为0.50.6。4. 4、5000rpm离心10min，收集菌体。5. 加入和扩大培养时培养液相同体积的70mmol/L CaCl溶液，重悬。6. 4、5000rpm离心10min，收集菌体。7. 加入体积为扩大培养时培养液1/10的70mmol/CaCl溶液，重悬。8. 分装为100L的小分，至于冰上备用。9. 若要冻存，需加入终浓度为15%20%的甘油。-80冻存。注：49步请注意无菌操作！专心-专注-专业