精选优质文档-倾情为你奉上这是我最近实验遇到的问题,拿出来请教一下各位我的目的基因经real-time pcr 验证,在病灶区和非病灶区中,20多对样本,两两对照,最低的表达差异也要高出10倍。但是我用western和组化研究蛋白时,发现表达几乎无差异。我在考虑可能是什么可能使得目的基因在mrna水平上变化如此之大(我认为这变化应该和我研究的疾病有关,可能是疾病的因,也可能是果,不然不会在疾病中表达差异这么明显这么一致,不知各位同意否),以便设计我下面的实验。我想出来的可能性:1、可能我的目的基因位于基因组拷贝数变化的一个区域内,可能是它相邻的基因在疾病中发挥了作用,但是我用real-time做过它相邻的基因,没有变化,因此我基本否认了这个猜测。2、也可能是另一种蛋白高表达引起了这个疾病,而这个蛋白可能同时又调控我研究的目的基因的表达,不知这样的猜测应该如何设计实验进行验证比较好?因为才疏学浅,只想到了这两种可能性,因为请问还有没有其他的可能性呢?望版上各位不吝赐教。首先建议验证qPCR assay的重复性和可靠性。2. 有无在mRNA水平由于alte