精选优质文档-倾情为你奉上实验五、PCR扩增和琼脂糖电泳检测一、实验目的 学习和掌握PCR扩增及琼脂糖电泳的基本原理和方法。二、实验原理多聚酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）的原理类似于DNA的天然复制过程。其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成：模板DNA的变性：模板DNA经加热至93左右一定时间后，使模板DNA双链解离成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；引物的延伸：DNA模板-引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性-退火-延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。因此，首先在待扩增的DNA片段两侧设计寡核苷酸引物，经变性（94）、退火（4568）和延
