精选优质文档-倾情为你奉上流式细胞仪上机操作培训手册一、样本处理以PBMC表面抗原的流式检测步骤为例1) 取样。取新鲜提取或冻存后复苏的PBMC；2) 编号。根据实验设计，标记好流式管，如每份PBMC设两管：a) 1号管：相应同型对照；b) 2号管：CD3,CD4,CD8,CD56四标管；3) 加样。用移液器取100ul细胞/管（约1106个细胞/管），分别加到已经标记好的流式管底部；4) 洗涤。加入1ml PBS/管，涡旋1600rpm/min，离心6min；5) 染色。弃上清，加入100 l PBS/管涡旋混匀细胞，并根据实验设计，向各流式管中加入相应的荧光素标记抗体，混匀，室温避光孵育30min（操作尽量保持在避光条件下进行。）6) 洗涤。加入1ml PBS/管，涡旋1600rpm/min，离心6min；7) 重悬。弃上清，加入0.5ml PBS/管，混匀，上机检测(可选择BD FACSCanto II或BD Accuri C6)。（注：若不能及时上机，应加入4%多聚甲醛固定，并于4避光保存。）8） 试验结果分
