肝微粒体的提取及其含量测定(共6页).docx

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资源描述

精选优质文档-倾情为你奉上人肝微粒体的提取及其含量测定第一部分:人肝微粒体的提取一、仪器及试剂:仪器:内切式匀浆机,高速离心机,超速离心机,表面皿数个,冰袋数个,碎冰,装碎冰烧杯,匀浆用玻璃管,不锈钢剪刀试剂:含0.15M KCl的100mM磷酸钾缓冲液(PH7.4),100mM磷酸钾缓冲液材料:8号人肝(称取重量29.95g)二、实验流程:组织(记录死亡时间、储运条件)37度水浴解冻含0.15 M KCl 的100 mM磷酸钾缓冲液(pH 7.4)漂洗,除去表面血迹及组织液(缓冲液事先已置于冰箱中冷藏)将组织置于下垫冰块的表面皿中,用剪刀手动剪碎内切式均浆机匀浆(过程中注意将组织置于冰块包围住,保持低温环境)9000 g离心20 min,取上清,即得S9超速离心机105,000 g 超速离心60 min取沉淀(过程中防止上清表面的油膜粘附到沉淀表面,应用吸管将油膜慢慢吸出,而不能倾倒)重悬于100 mM磷酸钾缓冲液(pH 7.4)中(重悬过程中应注意不要产生

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