第八章 PCR技术及其应用 前言 PCR技术简史 第一节 PCR技术原理和工作方式 第二节 PCR产物的克隆 第三节 PCR扩增未知DNA片段 第四节 与反转录相关的PCR 第五节 PCR产生DNA指纹 第六节 实时定量PCR 本课件是在网络资源基础上改进而成，在此对有关人士特致感谢！一、PCR的基本原理 类似于DNA的体内复制。 首先待扩增DNA模板加热变性解链，随之将反应混合物冷 却至某一温度，这一温度可使引物与它的靶序列发生退火 ，再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。 这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环，PCR就是 在合适条件下的这种循环的不断重复。 第一节 PCR技术原理和工作方式Denature template DNA by heat (95 o C) Target Sequence Target Sequence 模板DNA 的变性：模板DNA 经加热至95左右一定时间后，使 模板DNA 双链或经PCR 扩增形成的双链DNA 解离，使之成为单链 ，以便它与引物结合，为下轮反应作准备； PCR Cycle - Step 1 PCR Cycle -
