一抗、二抗的选择ppt课件.ppt

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一抗、二抗的选择一抗的选择 1. 分析实验应用类型 WB (WesternBlot 免疫印迹 ) IHC (immunohistochemistry 免疫组织化学) ELISA (enzyme-linkedimmunoadsordent assay 酶联免疫吸附试验 ) 2. 样本蛋白的结构性质 样本蛋白的结构域 全长蛋白、蛋白片段、多肽、 细菌、细胞 样本的提取和处理过程 u 某些抗体要求样本经过某些特殊处理 ,例如:许多抗体只识别还原和变性 的、表位已暴露不受二级四级结构阻 碍的蛋白样本, u 某些抗体仅识别天然折叠状态的蛋白 。当选择免疫组化的抗体时,应注意 某些抗体只识别未固定的冷冻的组织 , u 另一些抗体则适用于无需抗原修复解 交联步聚的甲醛固定石蜡包埋的组织 , 蛋白片断或一种 特殊的同型物或 蛋白全长的某一 区域 用含此片段域 的免疫原制备 出的抗体。 用FACS 流式检 测活细胞的表面 蛋白 用含该表面蛋 白的胞外域来 免疫制备的抗 体。 3. 样本的物种 选择物种相同或有交叉反应的抗体,抗体可能与 不同物种的同种靶蛋白有交叉反应,因其氨基酸 序列同源性较高,如果样本

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