精选优质文档-倾情为你奉上过氧化氢酶的活性的测定紫外线吸收法一、原 理 H2O2在240nm波长下有强烈吸收,过氧化氢酶能分解过氧化氢,使反应溶液吸光度(A240)随反应时间而降低。根据测量率的变化速率即可测出过氧化氢酶的活性。二、材料与设备 植物材料:植物的叶 实验材料:紫光分光光度计、离心机、研钵、250ml容量瓶、0.5ml吸管1支、10ml试管1支 试剂:0.2mol/LpH7.8磷酸缓冲液 0.1mol/ H2O2(用0.1mol/L高锰酸钾标定)三、操作步骤 1、酶提取液:称取叶片0.5g置于研钵中,加入pH7.0的磷酸缓冲液研磨成为匀浆,并用缓冲溶液清洗研钵数次(共用6ml磷酸缓冲液,缓冲液分几次加入),取上部澄清液在4000rpm下离心15min,上清液即为过氧化氢酶粗提液。保存备用。 2、测定:取10ml试管1支,按表20-2顺序加入试剂。紫外线吸收法测定H2O2样品配置表管号S1粗酶液0.2pH7.8磷酸1.5蒸馏水1.0在管中加入0.3m