分子克隆技术限制性内切酶 v 特定的识别序列，46 个碱基对 v 在识别序列内固定位置切割，5- 端磷酸 基因， 3- 端羟基基团 v 切割后形成粘性或平滑末端C A T C G A C G A A T T C G T A G C T G C T T A A G G A A T T C T G C C A G G T EcoRI 酶切位 点 双 链 切 开 C T T A A G A C G G T C C A C A T C G A C G A A T T C G C T T A A G A C G G T C C A A A T T C T G C C A G G T G DNA 连 接 酶 形成新的DNA 双链 G T A G C T G C T T A A A A T T C T G C C A G G T. C A T C G A C G G A C G G T C C A. .G T A G C T G C T T A A 限制性内切酶和DNA 连接酶质 粒 v 细胞内独立于染色体外的环状DNA ，能 自我复制 v 其上基因可借助宿主细胞的转录、翻译 系统得以表达 v 分子
