第四节 核酸的凝胶电泳 Nucleic Acid Gel ElectrophoresisContent of Table 前 言 一、 琼脂糖凝胶电泳 二、 聚丙烯酰胺凝胶电泳 三、 脉冲场凝胶电泳前 言 核酸凝胶电泳是分子克隆核心技术之一, 用于分离、鉴定和纯化DNA或RNA片段; 优点:(1)便于分离;(2)便于检测 ;(3)便于回收: 核酸凝胶电泳的基本原理 1)核酸分子之糖-磷酸骨架中的磷酸基团,呈负离子化状 态;核酸分子在一定的电场强度的电场中,它们会向正电 极方向迁移; 2)由于在电泳中往往使用无反应活性的稳定的支持介质 ,电泳迁移率(或迁移速度)与分子的摩擦系数成反比。 而摩擦系数是分子大小、介质粘度等的函数; 因此,可在同一凝胶中、一定电肠强度下、可在凝胶 上分离出不同分子量大小或相同分子量但构型有差异的核 酸分子。 Home一、 琼脂糖凝胶电泳 Agarose gel electrophoresis(一)凝胶的制备及电泳(二)DNA 的迁移速率决定因素 1 DNA分子的大小 双链DNA分子迁移的速率与其碱基对 数的常用对数近似成反比; 2 琼脂糖浓度 浓度越低,相同核