定点突变技术 基因突变包括单个碱基或片断的替换， 基因片断的插入与删除等 根据其特点可将基因突变技术分为两大 类： 位点特异性突变 定点突变 随机突变 定点突变的研究意义 1 对调控区进行突变 研究基因结构与功能之间的关系 2 对编码基因进行突变 检验特定残基在蛋白质结构、催 化活性和配基结合能力中的作 用。 获得突变蛋白。 位点特异性突变的类型 寡核苷酸介导的基因突变指用含有突变碱 基的寡聚核苷酸片断作为引物，在聚合酶的作 用下启动DNA分子进行复制。 盒式突变是利用一段人工合成的含基因突变 序列的寡核苷酸片段，取代野生型基因中的相 应序列。 PCR介导的基因突变Kunkel 法 在E. coli中 dUTP dUMP 在dUTP 酶缺失体中（dut - ） dUTP dUMP 在正常情况下，尿嘧啶糖基化酶(ung - )可以去除掺入DNA中的 尿嘧啶残基。但在ung - 的菌株中，此酶失活。 因此 在大肠杆菌dut - ung - 菌株中生长的M13噬菌体的DNA中将含有20 -30个尿嘧啶残基。用这些噬菌体感染ung+菌株，尿嘧啶被迅速去除， DNA链遭到破坏，感染力下降约5个数
