实时荧光定量PCR术详解和总结ppt课件.ppt

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实时定量PCR技术 目录 实时定量PCR基本原理 实时定量PCR实验材料 实时定量PCR实验方法 实时定量PCR实验结果实时定量PCR基本原理 1 实时定量PCR的定义 2 实时定量PCR标准曲线 定量PCR技术:利用荧光信号的变化实时检测PCR 扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,最终精 确的对起始模板的定量分析 实时定量PCR的定义定量PCR三个基本概念 扩增曲线 指数增 长期 平台期 线性增长期 背景期阈值与C(t)值 阈值:是循环开始315个循环的荧光信号的标准偏差的 10倍,设定在扩增曲线指数增长期 C(t)值:荧光信号(扩增产物)到达阈值时所经过的扩增 循环次数 Threshold line C(t) value C(t) value 18.12 +/- 0.04 Threshold line C(t) value C(t) value 18.12 +/- 0.04 C(t) value 18.12 +/- 0.04 C(t) value 18.12 +/- 0.04定量PCR的数学原理 理想的PCR反应: X n =X 0 2 n 非理想的PCR反应: X n =X

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